光合细菌分离及培养条件研究报告.docx

光合细菌分离及培养条件研究报告 光合细菌分离及培养条件研究报告 光合细菌分离及培养条件研究报告 个人资料整理 仅限学习使用 光合细菌 M-01 的分别及培育条件研究 [ 纲要 ] 从湛江市霞山区海滩表层污泥中富集分别出红假单胞菌属光合细菌  M-01, 对其培育条 件进行了初 步商讨 , 结果表示 : 菌株生长温度为 30e 果表示其最优 培育基配方为 : 氯化铵 2 g, 磷酸氢二钾 0.15 g, 硫酸镁  时, 最适培育光照度为 3 000 lx 。培育基正交实验结 0.2 g, 乙酸钠 4 g, 碳酸氢钠 2 g, 氯化钠 1 g, 酵母膏 储液少许 , 蒸馏水 1 000 mL 。此中乙酸钠为最大影响因子。 [ 重点词 ] 光合细菌 (PSB。分别。培育。正交实验 光合细菌 (Photosynthetic bacteria 是一类光合自养型古老细菌 , 拥有较强的分解有机物特 性, 光合 细菌作为水质净化剂宽泛应用于水产动物如一些经济鱼类、虾蟹、贝类的养殖和育苗中 [1~4] 。在生产上有 意义的红螺菌科包含红螺菌属、红假单胞菌属和红微菌属 [4] 。现已有学者对红假单胞菌的 分别、判定、培 养特征及收藏做了研究 [5~7], 但还没有对于其营养条件优化的报导。笔者从大海环境中分别 到了光合细 菌 M-01, 采纳正交实验方法进行了培育条件优化的研究。现将结果报告以下。 资料与方法 资料 (1 待分别资料 取广东省湛江市霞山区海滩表层污泥。 (2 培育基 使用红螺菌科富集培育基作为富集分别基础培育基[8] 。 方法 (1 菌株的分别挑选方法 取污泥 10 g, 装入 500 mL 细口无色玻璃瓶中 , 加入富集培育液至满 , 盖上 瓶盖 , 隔断空气 , 于 30e, 3 000 lx 光照下进行富集培育 3~4 d, 培育液呈绛红色后 , 取富集培 养菌液 1 mL,转接入培育液中 , 重复以上操作 2 次 , 而后采纳改进的 Hungate 厌氧培育技术 柱滚管法 [9] 进行 分别纯化 , 用分别培育基的琼脂柱穿刺培育后保留。 (2 细胞色素光谱汲取峰值测定方法 培育物离心后清洗 , 将细胞悬浮于 60%的蔗糖溶液中 , 采 用 722S 分光光度计扫描 , 波长范围为 340~1 000 nm 。 (3 生长量的测定 为比较不一样培育条件下 ( 光照、接种量、营养条件 培育物生长量的差异 , 采纳 722S 分光光度计检测培育物 D660 nm 值。 (4 光照度对菌株生长影响的测定 将已接种的光合细菌培育液于温度 30e, 光照度分别为 2 000、 3 000 、 4 000 、5 000 、 6 000 lx 下培育 3 d, 每组 3 管 , 用 722S 分光光度计测定培育物菌液 光密度 D660 nm(用 个人资料整理 仅限学习使用 培育初刚接种的培育液为空白比较 。 (5 酵母膏增添量对菌株生长影响的测定  在培育液中分别加入酵母膏  , 令其质量分数分别为 0100、 0105、0110 、 0115、 0120、 0125、0130 g/L 。 (6 培育基正交实验 依据预备实验 , 设计 5 因子 4 水平的正交实验 ( 表 1, 在温度 30e,3 000 lx  光 照条件下进行培育基的正交实验。 #72# 长江大学学报  ( 自科版  2005 年  8 月第  2 卷第  8 期/ 农学卷第  25 卷第  3 期 Journal of YangtzeUniversity(Nat Sci Vol125 No13 表 1 培育基正交实验要素水平  EditAug.  2005 Vol12  No18 /Agri  Sci  V, Table1 Factor levels of orthogonal experiment of the culture mediag/L 水平 A 氯化铵 B 磷酸氢二钾 C 乙酸钠 D 碳酸氢钠 E 酵母膏 1 015 011 210 015 0105 2 110 012 310 110 0110 3 115 013 410 115 0115 4 210 014 510 210 0120 结果与剖析 菌株形态特点及培育特点 共分别纯化菌株 5 株 , 记为 M-01、 M-02、 M- 03、 M-04、 M-05, 均为棕红色菌落 , 培育特点类 似 ,M-01 株生长速度较快 , 以其做以下实验。菌株 M-01 幼龄呈短杆状 , 不形成丝状体 , 细 胞大小 (016~019Lm@(112~210Lm。芽生 分裂 , 分裂时产生哑铃状的菌体。鞭毛染色 , 可见