超微结构基本知识座.pptxVIP

1;取材前要问几个问题: a 所要研究对象的解剖位置是否清楚?如海马….肾小球病变. b 要观察样品的外部还是内部结构？＿取材和固定前的处理不同（ＴＥＭ／ＳＥＭ），如肠上皮、牙齿髓腔的观察．．． c 是定量还是定性？ d 有横/纵向之分吗? 肌肉﹑神经等;２. 取材、固定;3.各类标本的取材;培养细胞:量的多少能做(培养瓶\孔板)；一般1mm3即可，１２或２４孔均可做ＴＥＭ／ＳＥＭ，其方法不同．ＳＥＭ细胞可更少．;二、超微结构观察与研究中值得注意的问题;3.半薄切片:补充上述缺陷. 生物样品的普通石蜡切片厚度为5微米左右,其观察深度远比超薄切片为大,即在石蜡切片和超薄切片之间不仅有观察范围大小的区别,也有观察厚度大小的显著差异.半薄切片厚度为1微米左右,一方面可为超薄切片定位,以选取电镜下观察部位,另一方面可供光镜观察标本的整体面貌. 通过LM 观察半薄切片可以检见通常在石蜡切片难以检见的形态结构,并据此可做出诊断.因为制作半薄切片的材料和技术操作过程不同于石蜡切片,而切片又较普通石蜡切片为薄,故其中某些组织成分得以较好保存和得以显示,有利于诊断. ;4.电子显微镜的分辨本领虽已远胜于光学显微镜，但电镜因需在真空条件下工作，所以很难观察活的生物，而且电子束的照射也会使生物样品受到辐照损伤。其他的问题，如电子枪亮度和电子透镜质量的提高等问题也有