高中生物总复习(考点知识详解十一).pdfVIP

第37讲 微生物的利用 [目标要求] 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作 用。 考点一 微生物的实验室培养 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对 pH 、 氧气以及特殊营养物质的要求。 (3)种类 ①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。 ②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。 2 ．无菌技术 (1) 目的：获得纯净培养物。 (2)关键：防止外来杂菌的入侵。 (3)常用方法：灭菌和消毒。 (4)无菌技术的主要方法及适用对象(连一连) 教材中的隐性知识 源于选修 1 P85附录4 “高压灭菌的操作方法” (1)灭菌桶装入待灭菌物品不要装太挤的原因是避免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。 (2)加热灭菌锅时应打开排气阀，目的是排除锅内冷空气，之后，才能关上排气阀。 3 ．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ①依据：配方比例 (1)计算②计算：配制一定体积的培养基时，各种成分的  用量 ↓ ①牛肉膏要放在称量纸上称量 (2)称量②牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅  速，称取后及时盖上瓶盖 ↓ ①牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量水，  加热，牛肉膏溶化后取出称量纸 (3)溶化 ②加入称量好的蛋白胨和氯化钠，搅拌 ③加入琼脂，加热使其熔化，并不断搅拌 ④补加蒸馏水定容 ↓ ①灭菌前：调节pH  (4)灭菌②方法：高压蒸汽灭菌法。压力为100 kPa，温  度为121 ℃，灭菌时间为15～30 min ↓ ①倒平板应在酒精灯火焰附近 (5)倒平板②灭菌方法是灼烧灭菌 ③平板倒置操作需要等待平板冷却凝固后 才能进行 4 ．纯化培养 (1)方法：平板划线法和稀释涂布平板法。 (2)菌落的概念：由单个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。 (3)平板划线法分离纯化大肠杆菌 在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，在摇床上37 ℃下 ① 接种 振荡培养12 h 划线 用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中沾取菌液一次，在固体培 ② 分离 养基的平板上连续划线，盖好培养皿 ③ 培养 将培养皿倒置，放在37 ℃恒温箱中培养12～24 h 后，可看到划 观察 线的末端出现不连续的单个菌落 (4)稀释涂布平板法步骤 ①系列稀释操作：该操作常用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞， 随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。 操作步骤： ②涂布平板操作步骤 教材中的隐性知识 源于选修 1 P18 “旁栏小资料” (1)微生物的接种方法除平板划线法和稀释涂布平板法外，还包括斜面接种、穿刺接种等方法。 (2)微生物接种的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。 5 ．菌种的保藏方法 主要方法 临时保藏法 甘油管藏法 保藏对象 频繁使用的菌种 长期保藏的菌种 先接种到试管的固体斜面培养基上 转入灭菌后的甘油中，混匀 方法步骤 培养，然后放 4 ℃的冰箱中 后放在－20 ℃冷冻箱中保存 (1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质( √ ) (2) 由于物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型( × ) (3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(