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加压筛选试剂 MTX加压方法筒介 诞生于70年代末的基因工程药物因其具有 其他药物无法比拟的优点，己迅速成为制药工业 中一个引人注目的领域。1995年美国基因工程 药物销售额约为48亿美元，1997年超过60亿 美元，年增长率达20%以上。各国政府将其视 为新的经济增长热点而给予了大力支持。基因工 程药物研发的主要环节包括：基因克隆和工程广 构造；重组细胞培养；目的产物分离纯化等。针 对以上主要环节，研究人员正致力于高效表达、 培养工艺及下游分离纯化等方面的研究。目前已 有多种表达系统应用于表达具有医疗价值的蛋 白质，如大肠杆菌、酵母、昆虫杆状病毒系统、 哺乳动物细胞等表达系统。大多数药用蛋白都是 糖蛋白，中国仓鼠卵巢细胞（CHO）是目前重 组糖基蛋白生产的首选体系，已有越来越多的药 用蛋白在其中获得了高效表达，部分药物已投放 市场，例如EPO、G-CSF＞组织型纤溶酶原激 活剂t-PA. CD受体、单克隆抗体、乙型肝炎表 面抗原、白介素、干扰素等。 影响重组蛋白在CHO细胞中表达的因素很 多，层次也很广泛，涉及CHO细胞表达体系、 表达载体系统、外源基因、表达细胞株的加压扩 增与筛选、细胞大规模培养等。转录是真核基因 表达调节的基本控制点，研究表明：所有提高转 录水平的策略主要通过载体构建、基因转染方法 和选择不同标记来调控；CHO细胞表达体系和 外源基因影响mRNA的翻译；表