细胞培养基本知识.pptxVIP

会计学;体外培养的设备和器具;超净工作台;CO2培养箱;自动双重纯水蒸馏器;培养器皿;常用玻璃器皿清洗;清洁液的配制;胶塞和塑料用品的清洗;过滤除菌装置;细胞培养的概念;原代培养细胞的生命归宿;体外细胞培养物的生长类型;每代贴附生长细胞的生长过程;;第16页/共43页;传代的方法;贴壁生长细胞传代方法;培养细胞生长的条件;细胞培养用液;消化液 1. 胰蛋白酶：主要用的是0.25％胰蛋白酶液，胰蛋白酶是一种黄白色粉末，用无Ca2+、Mg2+的PBS缓冲液配制，过滤除菌。它作用于与赖氨酸或精氨酸相连接的肽健，除去细胞间粘蛋白及糖蛋白，影响细胞骨架，从而使细胞分离。浓度越高，作用越强，但超过一定限度会损伤细胞。用含血清培养液终止其消化作用。 2. EDTA：是一种化学螯合剂，对细胞有一定的解离作用。毒性小、价格便宜、使用方便。 3.胶原酶溶液：又称羧肽酶，有胶原酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型及肝细胞专用胶原酶5种，可根据制备不同组织细胞悬液选择不同类型的胶原酶;培养基;1. 天然培养基：有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限，成分复杂，影响对某些实验产物 的提取和实验结果的分析，易发生支原体污染 。 2. 合成培养基：是根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质