DNA突变技术基本原理学习资料.pptVIP

第三章 DNA突变技术;基因突变包括单个碱基或片断的替换，基因片断的插入与删除等。 根据其特点可将基因突变技术分两大类： 1.位点特异性突变 定点突变 2.随机突变 表型筛选 ;随机突变 易错PCR法(Error-prone PCR) 降低一种dNTP的量（降至5％-10％） 加入dITP来代替被减少的dNTP 缓冲液中另加0.5mmol/L Mn2+ DNA Shuffling 外显子、单基因和基因家族的重组装 随机引物延伸法 交错延伸法 定点突变 点突变——碱基删除、增补和替换;How DNA shuffling is done in the tube Random fragmentation of a pool of related genes; Self-priming polymerase reaction and template switching (causing crossovers); PCR amplification with primers of reassembled products ;How DNA shuffling works ？;;DNA 重组装的过程;磷脂酶热稳定－催化活性的分子进化 （Jae Kwang Song等，2000）;β-葡糖苷酶耐热性的提高 (Mary