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3.2月季的花药培养会计学第1页/共22页花的结构:花粉粒(1N)单倍体植株(1N)二倍体纯合子植株(2N)第2页/共22页植物的花药培养在育种上有什么意义？明显缩短育种年限,为新品种的培育开辟了新途径。第3页/共22页一、基础知识：花丝雄蕊花药：囊状结构,内有很多花粉P37（一）被子植物的花粉发育1.被子植物的花粉是在 中由 细胞 经过 分裂形成的。 所以，花粉是 的生殖细胞花粉母花药减数单倍体第4页/共22页(一)被子植物的花粉发育填图：第5页/共22页( )个精子(n)2小孢子母细胞(2n)( )分裂有丝( )分裂减数( )细胞(n)生殖( )细胞(n)营养( )时期(n)四分体( )细胞核(n)生殖( )细胞核(n)花粉管( )居中期(n)单核( )分裂有丝( )靠边期(n)单核花粉粒(双核期)第6页/共22页(1)由此可见,被子植物的花粉的发育要经历 时期， 期和 期等阶段。四分体单核双核相 同2个精子和1个营养核的基因型是否相同?(2)在正常情况下,若一个有24对染色体的植物开花， 其一个小孢子母细胞可以产生 个精子， 精子中的染色体数目是 ； 在一枚花药中可以产生很多个花粉。824条12对？第7页/共22页【思考1】营养细胞在花粉管生长过程中的作用是什么？控制花粉的萌发并提供营养。【思考2】花粉的染色体组成与体细胞有什么区别？ 为什么？花粉的染色体只有体细胞的一半，无同源染色体（二倍体生物）【思考3】减数分裂过程中和被子植物花粉发育 过程中的四分体是一回事吗？为什么？不是一回事。前者的四分体时期是指同源染色体配对后，一对同源染色体含有四条染色单体的阶段；后者的四分体时期是指4个单倍体的细胞（小孢子）连在一起的时期。第8页/共22页(二)产生花粉植株的两种途径：丛芽胚状体胚状体愈织愈伤组织丛芽【思考4】花药培养产生花粉植株的两种途径的差别主要取决于 。培养基中激素的种类及浓度配比(没有绝对的界限)P38第二段第9页/共22页P38小字【思考5】什么是体细胞胚？ 在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。【思考6】单倍体性细胞产生的花粉胚,也可发育成为单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？ 有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。(三)影响花药培养的因素 1.影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素： 和 等。第10页/共22页P392.材料的选择:材料的选择培养基的组成初花期单核期①从花药来看,应当选择 (初花期、盛花期、晚花期)的花药;②从花粉来看,应当选择 (四分体期、单核期、双核期、萌发期)的花粉，因为单核期以前的花药 ，选择单核期以后的花药接种， ;③从花蕾来看,应当选择 (完全未开放、略微开放、完全盛开)的花蕾。质地幼嫩，极易破碎 花瓣已有些松动又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核期的花药 完全未开放第11页/共22页【思考7】为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功率的重要因素？ 因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。P38-39【思考8】为什么花药的培养要选择完全未开放的花蕾？这种花蕾,可挑选到单核期的花药,菌少、易消毒P39【思考9】为什么花瓣松动会给材料消毒带来困难？松动后微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难【思考10】除此之外,你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？植物的种类、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件P39第12页/共22页二、实验操作（一）材料的选取1.选择花药时一般通过 确定花粉发育时期， 此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂 是 和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以 将细胞核染成 色和 色。2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用 处理20min。该试剂的配制方法 是将 按体积比为 的比例 混合均匀。 P39镜检醋酸洋红红蓝黑卡诺氏固定液无水酒精和冰醋酸 3:170%无菌水（二）材料的消毒第13页/共22页无菌吸水纸质量分数为0.1%的氯化汞花蕾(酒精 )大约30s( )清洗无菌水( )吸干水分( )2～4min( )冲洗【思考11】月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较， 二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。第14页/共22页【思