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补体检测及应用会计学第1页/共33页第一节 补体的性质与活化途径一、补体的性质补体是一组存在于人和脊柱动物血清及组织液中,具有酶样活性,不耐热,功能上连续反应的糖蛋白,是抗体溶解细胞必要的补充条件。第2页/共33页补体系统组成补体的固有成分；C1-C9、C1q、C1r C1s共11中蛋白分子调节和控制补体系统活化的成分；C1抑制物，膜协同因子蛋白等补体受体：补体C3的受体，CR1-5等第3页/共33页参与机体的抗感染防御反应，介导细胞溶解，调理吞噬，免疫黏附以及参与炎症反应引起的机体的免疫损伤，是体内具有生物学功能的免疫效应系统和放大系统补体系统功能第4页/共33页二 、主要两种补体的活化途径（一）经典途径：是以IgG或IgM类抗体结合抗原后的免疫复合物为主要的激活剂，补体的11种成分全部参与的途经。分为识别、活化和膜攻破三个阶段。第5页/共33页（二） 替代途径（旁路途经） 激活剂是微生物的菌体多糖、内毒素、蛋白水解酶、IgG4和IgA聚合物等，参与的成分C3、C5-C9、B因子、D因子、P因子。第6页/共33页两种补体激活途径的比较 经典途径 替代途径激活物 抗原抗体复合物 脂多糖、酵母多糖参与成分C1-C9 C3、C5-C9 B、D、P因子始动分子C1q C3b所需离子Ca+2、Mg +2Mg +2C3 转化酶C4b2a C3bBbC5转化酶C4b2a3b（C3b）nBb 或 （C3b）nBbP第7页/共33页第二节 补体总活性测定一、血清补体总活性测定（CH50试验）（一）实验原理： 特异性抗体与红细胞结合后可激活补体，导致红细胞表面形成跨膜小孔，使胞外水分渗入，引起红细胞肿胀而发生溶血，溶血程度与补体的活性有关。溶血反应程度与补体的剂量依赖呈S型曲线。第8页/共33页第9页/共33页（二）试验方法1.2%-5%绵羊红细胞（SRBC）的配置2.溶血素：抗绵羊红细胞抗体，是以SRBC免疫家兔所得的兔抗血清。试验前要进行溶血素的稀释和滴定。3.稀释缓冲液:PH7.2-7.4磷酸盐缓冲液 Ca+2、Mg +2 第10页/共33页不同稀释度溶血素的配置最终稀释度 稀释液(ml)稀释度 溶血素（ml）1:1000 1.8 1:100 0.21:2000 0.2 1:1000 0.21:3000 0.4 1:1000 0.21:4000 0.2 1:2000 0.21:5000 0.8 1:1000 0.21:6000 0.2 1:3000 0.21:8000 0.2 1:4000 0.21:10000 0.2 1:5000 0.2第11页/共33页溶血素的滴定管号 溶血素 试管内加入的试剂量（ml） 稀释度 溶血素 1:60 补体 缓冲液2%SRBC结果1 1：1000 0.1 0.2 0.2 0.1全溶血2 1：2000 0.1 0.2 0.2 0.1全溶血3 1：3000 0.1 0.2 0.2 0.