慢病毒包装浓缩纯化滴度试验步骤.docx

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2022-03-17 发布于天津
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一、包装细胞293T细胞的培养一、293T细胞的冻存 .随着传代的次数增加，293T细胞会出现生长状态下降，出现突变等。所以要在细胞购进时就进行冻存。 .在细胞对数生长期进行冻存，增加细胞复苏成活率。 .倒去细胞上清液，加入D-Hanks液洗去残留的培养基。 .加入0.25%的胰酶，消化10-20S后倒去。 .镜下观察细胞变圆，细胞间间隙加大时，加入新鲜培养基吹打混匀。 .细胞计数。 .将细胞离心，1000rpm,2min。 .根据计数结果加入细胞冻存液（70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO）重悬细胞，密度为3X106个/ml。 10.第二天将细胞放入液氮灌，并记录。二、293