探究培养液中酵母菌种群的动态变化培训教材.pptVIP

探究培养液中酵母菌数量的动态变化  1．实验原理： （1）在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。 （2）养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。 2．实验目的： （1）通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。 （2）用数学模型解释种群数量的变化。 （3）学会使用血球计数板进行计数。 三、探究培养液中酵母菌种群数量的变化 1、提出问题：(用问句) 2、作出假设: (用陈述句) 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？ 也可以提出其他的探究问题，例如， 在不同温度（以及通氧、通CO2等）条件下酵母菌种群数量增长的情况如何？ 不同培养液（如加糖和不加糖）中酵母菌种群数量增长的情况如何？等等。 开始在资源和空间无限多的环境中,酵母菌呈J型增长 ,随着时间的推移环境中资源和空间逐渐变得有限,代谢废物的积累，酵母菌呈S型增长. [实验过程] 一、材料用具 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板（2mm×2mm×0.1mm方格）、滴管、显微镜等。 二、方法步骤和记录 1、取相同试管若干支，分别加入5ml肉汤培养液，塞上棉塞。 2、用高压锅进行___________灭菌后冷却至室温，标记甲、乙、丙等。 3、将酵母菌母液分别加入试管各5ml，摇匀后用______________计数起始酵母液个数，做好记录。 4、将各试管送进恒温箱，_____________℃下培养7天。 高压蒸汽 血球计数板 25° （1）血球计数板构造： 实物图 正面图 纵切面图 计数室，2个 滴液处 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。一个特制的可在显微镜下观察的玻片 大方格 中方格 小方格 计数室 平台上有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室 计数室放大 计数室有两种规格： 一是分为16个中方格， 每中方格中有25个小方格； 另一种是分为25个中方格， 每中方格有16个小方格。 两种都共有400个小方格。 计数室 计数时用25中格的计数板，要按对角线方位，取左上、左下、右上、右下、中央5个中格(即80小格)的酵母菌数。 如果是16中格计数板,则只数四角上的四格酵母菌数（即100小格）。然后求出一个小方格的细胞平均数(N) 放大 放大 对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。 c.从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多，将计数室充满即可），勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。 方 法?? a.视待测菌悬液浓度，以每小格的菌数可数为度。培养后期的样液稀释后再计数，加无菌水适当稀释，如菌液不浓，可不必稀释。 b.取洁净的血球计数板 一块，在计数区上盖上一块盖玻片。 d.静置片刻（待细胞全部沉降到计数室底部），将血球计数板置载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数.由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。 滴液处 e．一般选取计数室内四个角及中央五个中方格计数，若细胞位于小方格的线上，应遵循“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则，以减少误差。 f.对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品计数应重复3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），取其平均值,求出每一个小格中细胞平均数（N），按公式计算出每ml菌悬液所含酵母菌细胞数量。 g.测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。 第 4 天 第 6 天 第 1 天 死亡 第 7 天 此法计得的是活菌体和死菌体的总和 每隔24小时取样计数。(注意计数时间每天要固定) 三、现象观察 每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。 菌数 时间 （天） 次数 起始 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 … … … … … … … … … 平均 多次测量取平均值。减少误差，力求准确。 四、实验结论 1、根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群数量7天中的变化曲线。 2、培养液酵母菌种群数量随时间呈__________型增长变化。 S 探究实验设计时要遵循的原则： 科学性原则、可行性原则、对照原则、 单一变量原则和平行重复原则。 本