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高中生物知识点《实验：绿叶中色素的提取和分离》 绿叶中色素的提取和分离： 1．原理 (1)各种色素能溶解在有机溶剂（无水乙醇等）中形成溶液，使色素从生物组织中脱离出来。 (2)各种色素都能溶解在层析液中，但在层析液中的溶解度不同。溶解度大的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，因而不同色素可以在滤纸上通过扩散分开，各种色素分子在滤纸上可形成不同的色素带。 2．实验过程  观察结果：滤纸条上色素带有四条，由上到下分别是胡萝卜素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素a、黄绿色的叶绿素b， 如图  实验要点及注意事项： 1、实验中几种化学药品的作用 ①加入少量SiO2，可破坏细胞结构，使研磨更充分，便于色素完全释放。 ②加入少量CaCO3，，可以中和细胞内的有机酸，防止有机酸夺取叶绿素中的镁离子使叶绿素破坏，从而起到保护色素的作用。但SiO2.和CaCO3的加入量要少，否则滤液杂质多、混浊、颜色浅，实验效果差。 2、实验成功的关键 ①叶片要新鲜，颜色要深绿，保证色素的含量。 ②研磨要迅速充分。叶绿素不稳定，易被破坏，时间过长或研磨不充分都会导致色素的量太少而使实验失败。 ③滤液细线不仅要求细、直、均匀，而且要求含有较多的色素（可以重复画二至三次）。 ④滤液细线不能触及层析液，否则色素溶解到层析液中，将得不到清晰的色素带。 3、注意事项 ①制备滤纸条时，要剪去两角，这样可以减小边缘效应，使色素在滤纸上扩散均匀，便于观察实验结果。 ②收集滤液后，要及时用棉塞将试管口塞紧，防止滤液挥发。 4、滤纸条上的滤液细线，不能触及层析液的原因：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。 5、提取和分离叶绿体色素的关键： （1）提取叶绿体色素的关键是：①叶片要新鲜、浓绿；②研磨要迅速、充分；③滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。 （2）分离叶绿体色素的关键是：①是滤液细线要细且直，而且要重复划几次；②是层析液不能没及滤液线。 6、收集到的色素滤液绿色过浅，可能原因如下： ①未加二氧化硅，研磨不充分。 ②使用放置数天的菠菜叶，滤液中色素（叶绿素）太少，绿色过浅。 ③一次加入大量的95%的乙醇，提取浓度太低（正确做法：分次加入少量95%的乙醇提取色素）。 ④未加碳酸钙或加入过少导致色素分子被破坏。 7、如果滤纸条色素带重叠，原因可能是滤纸条上的滤液细线接触到层析液。 知识拓展： 实验创新：本实验中的长条滤纸可以改为圆形滤纸，在滤纸的中央滴一滴滤液，然后用一根浸有层析液的棉线的一端垂直接触滤液的中必位置，会得到近似同心的四个色素环，由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。 例 以“叶绿体中色素的提取和分离”实验中，下列描述正确的是( ) A．将5g新鲜完整的菠菜叶，放入研钵中，加入无水乙醇、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨 B．用毛细吸管吸取少量滤液；沿铅笔线处小心均匀地画出一条滤液细线，并连续迅速地重复画2～3次 C．把画好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散 D．色素分子是有机物，不溶于水，所以研磨过程中加入无水乙醇是为了溶解色素 答案D