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- 2022-04-12 发布于广东
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(三)、二硫键的断裂 盐酸胍/尿素解离多肽链间的非共价力。 应用过甲酸氧化法或巯基还原法拆分多肽链间的二硫键。 当前62页,共106页,星期一。 第六十二页,共一百零六页。 1、酸水解 常用6M盐酸或4M硫酸 优点:水解产物不消旋 缺点:Trp被沸酸完全破坏 含羟基Ser、Thr、Tyr部分分解 Asn、Gln酰胺基被水解 (四)、氨基酸组成的分析 当前63页,共106页,星期一。 第六十三页,共一百零六页。 2、碱水解 一般用5M氢氧化钠 缺点:许多AA受到不同程度的破坏 部分水解产物发生消旋化 优点:Trp不受破坏 (四)、氨基酸组成的分析 当前64页,共106页,星期一。 第六十四页,共一百零六页。 1、酶解法: 内切酶:胰蛋白酶、糜蛋白酶、 胃蛋白酶、嗜热菌蛋白酶 外切酶:羧肽酶和氨肽酶 多肽链的选择性降解 (五)、多肽链的部分裂解和 肽段混合物的分离纯化 目前序列分析方法最长只能几十个残基,因此需要裂解多肽,然后分离纯化。 当前65页,共106页,星期一。 第六十五页,共一百零六页。 R1=Lys(K)或Arg(R) 专一性较强,水解速度快 R2=Pro(抑制) 肽链 水解位点 胰蛋白酶trypsin 减少断裂点: 保护Lys侧链ε-NH2或修饰Arg胍基 增加断裂点: 将C
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