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第六章 认识海洋微生物工作任务二 海洋微生物的应用价值一 海洋微生物与海洋污染治理能够降解石油的微生物达200多种,分属于70多个属,其中细菌约占40属,在海洋生态系统中占主导地位。二 生物技术农药产业现在已开发出的有无残毒杀虫剂、植物促进激素、海洋前列腺素等海洋微型藻实例:利用广西发现的微藻提取物开发的一种生物技术农药——施特灵,对果树、蔬菜防病效果达50%~90%,降低药费大于50%,增产效果为8.5%~30%三 海洋制药产业海洋微生物制药的优势?海洋微生物是新型生物活性物质和先导化合物的重要来源。各国相继开展了海洋生物抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗心脑血管病、抗艾滋病等活性成分的研究。在过去的几十年间,6000 多种海洋天然产物被发现。四 动物饲料产业多实验表明:添加微藻的饲料增加了鸡、猪、牛、羊等动物的生存率、产仔率,增加了动物产量,增加了鱼肉及外观的色泽五 海洋微生物保健食品产业小球藻、螺旋藻已被列为最好的植物蛋白源之一,被投入到保健食品市场新型的保健品与营养强化剂探讨:海洋微生物开发的促进作用进一步了解未知的海洋世界;开发新药物,造福人类;减少对陆地有限资源的依赖性;寻找新的方法解决能源危机、环境危机等问题。我国海洋微生物开发现状起步较晚,发展水平较低,但发展速度迅猛,在一些领域的研究已经达到国际先进水平!尤其是海洋制药与保健品业的发展引人注目!我国海微洋生物开发的瓶颈问题缺乏创新产业规模小人才匮乏资金不足缺乏政策扶持 海洋微生物的研究方法一 培养计数(1)、MPN法;(2)、平板涂布二 显微计数(1)、荧光显微镜直接计数:1973年用落射荧光显微镜对细菌进行计数。1977年应用了吖啶橙(AO)对细菌进行染色后过滤到用Irgalan溶液染黑的0.2μm核孔滤膜上,用荧光显微镜进行计数。1980年Porter和Feig改进对细菌的染色方法即用4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)对细菌进行染色。 免疫荧光显微镜法:原理:利用抗原和抗体相互作用的原理即荧光物质与微生物细胞相互作用,显微镜下进行荧光数量的测定就可。缺点:不太适合测定自然水样中细菌的总数(含有多个细菌种群。流动自动分析技术电阻变化法:电阻变化法在测定颗粒大小的同时也测定对应样品体积内颗粒的数量。缺点:颗粒的体积取代电解液的变化,从而导致电位差的变化,因此不能分清细菌和相等大小的颗粒。(4)数字图像分析法荧光显微镜上添加了CCD照相机和影像自动分析系统 缺点:受物镜放大倍数的影响,只能测定较大的细菌细胞的数量, 步骤繁琐。(5)流式细胞仪测定法激光打在颗粒上,产生不同的散射光,可以发射出荧光。散射光和荧光通过光电倍增管和光电二极管采集,并将其光信号转化为电信号输出,通过合适的软件把它数字化并进行分析。 缺点:样品的数目应该在 1000个/毫升以上。研究实例:深海微生物的研究目的:获得有关的微生物或基因筛选、分离:稀释混合涂布法、平板涂布等分子生物学手段:提总DNA(宏基因组),进行特异性的扩增,研究海洋微生物的多样性和分离筛选特殊的基因。进而利用基因工程手段来研究其中的基因序列产生的蛋白质等。
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