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关于标准菌株在质控中的应用 第1页,共20页,编辑于2022年,星期一 一、使用标准菌株的意义 二、如何选择和使用标准菌株 第2页,共20页,编辑于2022年,星期一 一、标准菌株 意义要做好微生物学检验质控,必须保存有一批标准菌株,作为对仪器、培养基、染色液、试剂和诊断血清的质控菌株,也可作为从事细菌检验的工作人员熟悉某些菌株的教具。 第3页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何选择标准菌株 1.标准菌株的条件⑴ 形态、生理、生化及血清学特性典,并 相当稳定。⑵菌株对所试药物产生恒定的抑菌环和恰 当的MIC?值。⑶ 对测试项目反应敏感。如测试巧克力琼 脂平板的分离能力,应选流感嗜血杆菌或脑 膜炎奈瑟菌。 第4页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何选择标准菌株 来源 (1)ATCC:美国标准菌种保藏中心 (2)NCTC:英国国家标准菌种保藏 伦敦 (3)CBS: 真菌中心收藏所 荷兰 (4)WFCC:世界菌种保藏联合会 (5)IFO: 大阪发酵研究所 日本 (6)UCM: 全苏微生物保藏所 苏联 第5页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何选择标准菌株 来源 (1)CMCC:中国国家微生物菌种保藏中心 (2)CGMCC:中国普通微生物菌种保藏中心 (3)ACCC:中国农业微生物菌种保藏中心 (4)CICC: 中国工业微生物菌种保藏中心 (5)中国医学真菌菌种保藏中心 中国医科院皮研所 (6)中国医学病毒毒种保藏中心 中国CDC病毒所 (7)中国鼠疫耶尔森菌菌种保藏中心 青海CDC 目前全球菌种保藏机构有300以上 第6页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何选择标准菌株 来源 实验室分离菌株(地方株): 实验室分离菌株必须经过严格鉴定,其 形态、生理、生化特征典型,经多次传 代,特征恒定,否则不能作为标准菌株。 第7页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何选择标准菌株 验证 ⑴实验室保存菌种是否按规定时间转种,是 否每3代作一次鉴定,是否有详细记录卡 (菌种名称、编号、来源、保存日期、传代) 等记录。 ⑵验证后不得擅自处理或带出实验室,如确 需要带离实验室,须经上级领导批准,并做 好详细的记录。 ⑶菌株应有专人保管,验证时要有2人在场并 及时做好交接工作。 第8页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何使用标准菌株 注意事项 ⑴ 不能用含有可发酵性糖的培养基保存菌种。⑵ 不可以使用选择性培养基,不能从药敏试 验平板培养基上留取菌株。⑶ 不可使培养菌干枯,所有试管要保持良好 的密封性。⑷ 对温度变化敏感的细菌,如淋病奈瑟菌和 脑膜炎奈瑟菌,不可贮存于冰箱,但可用 快速冷冻干燥法长期保存。⑸ 作为抗菌药物敏感试验用的标准菌株,由 保存状态取出后,不能连续使用1?周以 上,应定期传代,但一般不超过6?次,必 要时进行更换。 第9页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何使用标准菌株 注意事项 来自国际/国家菌种保藏中心(本标准要 求为ATCC菌株)或经ISO9002认证的经销商 提供的菌株(有资质) 制备储备菌株和工作菌株时一次制备多 份,每株菌原则上不能重复使用,通常工 作菌株不能再传代,但处理得当可再次使 用。 第10页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何使用标准菌株 微生物学质控 无菌试验 性能试验 菌种必须经国家或国际公认的菌种 所用培养基严格按照要求进行储藏。 第11页,共20页,编辑于2022年,星期一 二、如何使用标准菌株 质控菌株 分离培养基的质控 增菌及选择性 增菌培养基的质控 方法结果判断微生物学质控 第12页,共20页,编辑于2022年,星期一 三、如何使用标准菌株 方法 无菌试验: 制备好培养基础置37℃温箱过夜 培养,观察结果。 第13页,共20页,编辑于2022年,星期一 三、如何使用标准菌株 方法 性能试验(见图) 糖发酵培养基的质控 生化试验的质控 干燥培基与新配制培基的对比试验
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