植物组织培养 (2).pptVIP

● Skoog (1944)和崔澄（1948），通过对烟草茎段和髓培养发现，不定芽和不定根的发生由生长素/腺嘌呤的比例决定。 ● 1952年，Morel和Martin首次证实，通过茎尖分生组织的离体培养，可以由已受病毒侵染的大丽花中获得无病毒植株。 ● 1953年，Muir进行单细胞培养获得初步成功。 ● 1956年，Miller等由鲱鱼精子DNA中分离出一种首次为人所知的细胞分裂素，并把它定名为激动素(kinetin)。 ● 1957年，Skoog和Miller提出了有关植物激素控制器官形成的概念。 ● 1958年，Steward等以胡萝卜为材料，首次通过实验证实了Haberlandt关于细胞全能性的设想，成为了植物组织培养研究历史中的一个里程碑。 第30页，共47页，编辑于2022年，星期一 1.2.1.3蓬勃发展和应用时期（从20世纪60年代至今） 1960年，英国人Cocking用酶法分离原生质体成功，开创了植物原生质体培养和体细胞杂交的工作。 同年， Morel利用兰花茎尖培养对兰花进行营养繁殖；由于这一方法有巨大的实用价值，很快被兰花生产者所 采用，迅速建立起“兰花工业”。 1962年，Murashige和Skoog开发出最著名的Murashige和Skoog培养基（MS基本培养基），并被后来广泛采用的基本培养基。 第31页，共47页，编辑于2022年，星期一 1964年，印度人Guha和Maheshwari利用曼陀罗花粉培养获得第一例单倍体植株。从而开辟了单倍体育种技术。 ● 1971年，Takebe等获得第一例原生质体培养的再生植株。 ● 1972年， Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。 ● 1978年，Melchers等进行了番茄和马铃薯的体细胞杂交。 ● 1981年，Larkin和Scowcroft引入“体细胞无性系变异（Somaclonal variation）”这一术语。 第32页，共47页，编辑于2022年，星期一 1982年，Zimmermann利用电刺激进行原生质体融合。开发了原生质体的电融合法。 ●1983年，Zambryski等用根瘤农杆菌转化烟草，获得首例转基因植物。 ●1985年，Horsch等用土壤农杆菌对叶盘进行感染和转化，并得到再生的转化植株。 ● 1987年，美国人Sanford等发明了基因枪法用于单子叶植物的遗传转化。 第33页，共47页，编辑于2022年，星期一 第1页，共47页，编辑于2022年，星期一 第一章 绪 论 1.1 植物组织培养的定义与类型 1.1.1植物组织培养的定义 植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养环境，使其长成完整植株的过程。 第2页，共47页，编辑于2022年，星期一 第3页，共47页，编辑于2022年，星期一 第4页，共47页，编辑于2022年，星期一 第5页，共47页，编辑于2022年，星期一 康乃馨组织培养 第6页，共47页，编辑于2022年，星期一 1.1.2 植物组织培养的类型 （1）根据培养的植物材料不同分为： ①植株培养：对幼苗和较大植株等的培养。 ②胚胎培养：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。 ③器官培养：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。 ④组织培养（包括愈伤组织培养）：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。 ⑤细胞或原生质体培养： 第7页，共47页，编辑于2022年，星期一 （2）根据培养目的来分 ①试管嫁接 ②试管受精 ③试管加倍 ④试管育种 （3） 根据培养方法分 ①平板培养 ②微室培养 ③悬浮培养 ④单细胞培养 第8页，共47页，编辑于2022年，星期一 （4）根据培养过程分 ①初代培养（第一代培养）—指将从植物体上分离下来的外植体作第一次组织培养。 ②继代培养—指第一次培养以后将培养物转移到新的培养基上进行组织培养。 （5）根据培养基态相不同分 ①固体培养——指在培养基中加凝固剂 ②液体培养——指在培养基中不加凝固剂的组织培养。 第9页，共47页，编辑于2022年，星期一 愈伤组织：原指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在植物组织培养中，是指在人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。 第10页，共47页，编辑于2022年，星期一 外植体：把由活植物体上提取下来接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等均称为外植体。 第11页，共47页，编辑于2022年，星期一 植物组织培养的理论依据 细胞全能性是指植物体任何一个细胞都携带着一套发育成完整植株的全部遗传信息，在离体培