革兰染色法、细菌的特殊染色法教程文件.pptVIP

实验一 革兰染色法、细菌的特殊染色法 微生物学与细胞生物学教研室 实验目的 掌握细菌革兰染色的原理与方法 掌握细菌芽孢染色的基本原理与方法 熟悉普通光学显微镜的油镜使用与保养 实验原理 革兰染色法的简介 革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。由丹麦医师Christian Gram创立。 方法是先将细菌用结晶紫染色，加媒染剂（增加染料和细胞的亲和力）后，用脱色剂（乙醇和丙酮）脱色，再用复染剂染色。 实验原理 芽孢染色法的原理 芽孢具有厚而致密的壁，折光性强，通透性低，不易着色，用一般染色法只能使菌体着色而芽孢不着色。芽孢染色法都基于同一个原则，即除了使用着色力强的染料外，还需要加热或延长染色时间等，促进标本着色。然后使菌体脱色而芽孢上的染料仍然保留。经复染之后，菌体和芽孢呈不同的颜色。 实验材料-菌株 金黄色葡萄球菌（209P） 18-20h斜面 大肠杆菌 18-20h斜面 枯草芽孢杆菌 20-24h斜面 实验材料-试剂 蒸馏水 结晶紫 卢戈碘液 95%乙醇 番红花红 孔雀绿 实验步骤 革兰染色法 涂片 干燥 固定 初染（结晶紫1分钟） 水洗 媒染（碘液1分钟内换2-3次） 水洗 脱色（95%乙醇20-30秒） 水洗 复染（番红花红5分钟） 水洗 吸水纸吸干 镜检 实验步骤 芽孢染色法 涂片 干燥 固定 初染（孔雀绿20分钟） 水洗 复染（番红花红5分钟） 水洗 吸水纸吸干 镜检 实验结果 实验结果 其它项目 预习酵母菌和霉菌的形态观察 讨论 革兰染色法中关键步骤是哪一步？为什么？ 为什么芽孢和菌体会被染成不同的颜色？