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固定化酶及其应用研究进展 摘要：随着社会的发展，越来越多酶被人们广泛的应用在工业生产、 生物传感器和环境保护等领域。作为一种良好的生物催化剂，酶可以 在常温、常压等温和的反应条件下高效地催化反应,一些难以进行的 化学反应在酶的催化下能顺利地完成。 关键词：酶 固定化酶 应用 进展 酶是由生物体内自身合成的生物催化剂。多数酶的化学组成为 蛋白质。现已鉴定出3000种以上的酶，其中数百种已得到结晶。酶 具有催化效率高和高度专一性的特点，但易受强酸、强碱、高温等条 件影响，使蛋白质变性而失去催化活性。某些酶仅决定于它的蛋白质 结构，如脲酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。另一些酶为酶蛋白与辅 助因子结合形成的复合酶，称为全酶，在催化反应中，酶蛋白决定酶 反应的专一性，而辅助因子则直接对电子、质子或某些基团起传递作 用。固定化酶是把酶人工偶联到不溶于水的载体上，并长时间保持催 化活性，使过程连续化、简单化。酶的固定化就是通过化学或物理的 处理方法,使原来水溶性的酶与固态的水不溶性支持物相结合或被载 体包埋。固定化方法有物理吸附法、交联、共价结合及包埋等方法。 目前较先进的方法是将酶固定在生物膜或超滤膜上,制造出来的生物 膜反应器的生产能力有明显提高。经过固定化,酶具有了比原来水溶 性酶更多的优点:1)酶经过固定化处理一般稳定性有较大提高,对热、 pH 等的稳定性提高,对抑制剂的敏感性降低,有的酶具有了抗蛋白酶 分解的特性;2)反应完成后经过简单的过滤或离心,酶就可以回收,而 且酶活力降低较少,这样就降低了生产成本 ;3)固定化体系适合于连 续化、自动化生产,催化过程容易控制,且产品中不会带进酶蛋白或细 胞,改善了后处理过程,提高了酶的利用效率,降低了生产成本。 酶在生理学、生物化学、医学、农业、工业等方面具有重大意义。 酶作为生物催化剂,尤其是固定化酶作为多相生物催化剂 ,能够在非 常温和的条件下实现合成、降解及转换化学物质的特异性反应,效率 高,能源消耗少.这无疑向我们展示出一幅广阔的应用前景 . 现代意 义下的酶,已不单单是一些微生物的重要产物,它已成为现代生物产 业中一个不可缺少的组成部分。 一.固定化酶在工业生产中的应用 酶的固定化技术诞生以来,不论是早期从动物脏器和植物种子中 提取的酶,还是后来发现的种类繁多、功能多样的微生物酶都已经被 覆盖在固定化酶的研究领域中。固定化酶最早是应工业生产的需求而 产生的,到目前为止其最大的应用范围还是在工业生产上。其中,固定 化葡萄糖异构酶是世界上生产规模最大的一种,它可以用来催化玉米 糖浆生产高甜度的高果糖糖浆。自1972年这项技术产生以来,科学家 已经固定了几种芽孢杆菌和链霉菌中提取的葡萄糖异构化酶,并大量 应用于工业生产中。从目前的资料分析,不论是在我国还是在国际上, 今后几十年中它还将是应用最广、市场份额最大的固定化酶。 固定化酰化氨基酸水解酶是最早应用的工业化酶,将酰化氨基酸 水解酶固定于DEAE-葡聚糖凝胶上用来连续生产L-氨基酸,不仅降低 了酶的消耗量,而且减少了产品后处理的费用。 此外还有一些应用较为广泛的固定化酶:固定化淀粉酶用于淀粉 的糖化,可作为酒精和酿造发酵中原料的糖化剂 ;固定化碱性蛋白酶 可以高效去除丝织品和棉织品纤维上的多余蛋白,使织物更加柔软光 滑;固定化的酸性蛋白酶还可以将废胶卷上的明胶溶解 ,回收上面的 银颗粒;固定化脂肪酶既可以用来分解动植物油脂,使乳脂中的芳香 族脂肪酸游离而增加乳品的风味,也可用在工业上分解油脂生产脂肪 酸和甘油,还可以与淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶等配合作为消化剂 , 应用于皮革和毛皮的脱脂清洗;固定化纤维素酶作为一种全新的技术 在提高纤维素酶的效能上找到了一个很好的突破口,经过固定化处理 的纤维素酶,不但其稳定性有极大提高,而且可以重复利用,易于回收, 将纤维素酶用载体包埋,可直接将纤维素糖化,然后连续发酵生产酒 精。 二、固定化酶在生化制药中的应用 固定化酶的另一个巨大市场是用来生产工业、医学等领域的一些 纯度要求较高的制剂,这其中有最早生产的氨基酸,还有抗生素、核 酸、蛋白质抗体、高纯度的蛋白酶等。科研人员首先于1973年用固 定化的青霉素酰化酶生产制造各种半合成的青霉素和头孢霉素,后来, 我国的科学家也不断地尝试各种固定化方法,有的直接用戊二醛交联 产该酶的大肠杆菌,也有用 ABSE-交联琼脂糖与青霉素酰化酶直接偶 联,还有的利用三醋酸纤维素包埋和戊二醛交联相结合固定青霉素酰 化酶高产菌,这些试验