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测定方法: （一）测定水解释放的无机磷 鲍氏（Bodansky）法 （二）测定底物水解后的羟基化合物 1. 羟基化合物需与显色剂作用后比色测定 金氏（King）法 2. 羟基化合物在碱性条件下直接显色测定 对硝基酚磷酸盐（p-nitrophenyl phosphate, 4-NPP）法 第62页，共93页，编辑于2022年，星期一 金氏法测定血清碱性磷酸酶 ALP在碱性条件催化磷酸苯二钠水解，释放出酚和磷酸，酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化形成红色的醌类化合物，根据红色的深浅与校准酚比较，确定ALP的活性。 原理: 第63页，共93页，编辑于2022年，星期一 参考范围： 单位定义： 灵敏度较高，显色稳定，不需去蛋白，操作简单、快速准 确度和精密度都较低,受胆红素和溶血的干扰 方法评价： 100ml血清在37℃与底物作用15min，产生1mg酚为1个金氏单位 成人 3～13金氏单位，儿童 5～28金氏单位 第64页，共93页，编辑于2022年，星期一 速率法测定血清碱性磷酸酶 原理: 以对-硝基苯酚磷酸钠（4-NPP）为底物， AMP或二乙醇胺（DEA）为磷酸酰基的受体。在碱性条件下，ALP催化4-NPP水解释放出磷酸基团，生成游离对-硝基酚（p-nitrophenol, 4-NP），4-NP在碱性溶液中转变成醌式结