酶与催化反应.pptVIP

哺乳动物组织中酶的最适温度多在35～40℃之间 Taq DNA聚合酶最适温度为72℃ * 低温的应用 一般的酶在低温下活性降低，但酶本身不被破坏，其活性可随温度的回升而恢复 低温保存酶和菌种等生物制品 低温麻醉 第94页，共160页，编辑于2022年，星期四 五、 pH对酶促反应速率的影响 pH对几种酶活性的影响 第95页，共160页，编辑于2022年，星期四 pH对酶活性的影响主要有下列几个方面： （1）极强的酸或碱可以使酶的空间结构破坏，引起酶变性； （2）影响酶活性中心催化基团的解离状态，使底物不能分解成产物； （3）影响酶活性中心结合基团的解离状态，使底物不能与它结合； （4）影响底物和辅酶功能基团的解离状态。 第96页，共160页，编辑于2022年，星期四 酶催化活性最高时溶液的pH值就称为酶的最适pH。 人体内大多数酶的最适pH在6.5～8.0之间。 酶的最适pH不是酶的特征性常数。 第97页，共160页，编辑于2022年，星期四 六、激活剂对酶促反应速率的影响 酶的激活剂（activator） 使酶从无活性变为有活性或使酶活性增加的物质 必需激活剂（essential activator） 为酶促反应所必需，如缺乏则测不到酶的活性 Mg2+为己糖激酶的必需激活剂 非必需激活剂（non-essential activator） 可以提高酶的催化活性，但不是必需的 Cl-对唾液淀粉酶的激活作用 第98页，共160页，编辑于2022年，星期四 在酶促反应中，凡能与酶结合而使酶的催化活性下降或消失，但又不引起酶变性的物质称为酶的抑制剂（inhibitor，I）。 七、抑制剂对酶活性抑制作用 抑制剂可与酶活性中心内或活性中心外的必需基团结合，从而抑制酶的活性。 根据抑制剂与酶是否共价结合及抑制效果的不同，将抑制剂对酶的抑制作用分为可逆性抑制剂（reversible inhibitor）和不可性逆抑制剂（irreversible inhibitor）。 第99页，共160页，编辑于2022年，星期四 抑制剂与酶分子的必需基团共价结合引起酶活性的抑制，且不能采用透析等物理方法使酶活性恢复的抑制作用就是不可逆抑制作用。 （一）不可逆抑制作用 第100页，共160页，编辑于2022年，星期四 不可逆性抑制作用的抑制剂 ： 基团特异性抑制剂（group-specific inhibitor） 底物类似物（substrate analog） 自杀性抑制剂（suicide inhibitor） 第101页，共160页，编辑于2022年，星期四 1．基团特异性抑制剂与酶分子中特异的基团共价结合 一些酶活性中心的催化基团是丝氨酸残基上的羟基，这些酶称为羟基酶。 如胆碱酯酶和丝氨酸蛋白酶 有机磷化合物 羟基酶 失活的酶 酸 C H 3 CH N + HON RO P RO O O E + N RO P RO O O CH C H 3 N + + E OH 解磷定 失活的酶 有机磷-解磷定复合物 活化的酶 第102页，共160页，编辑于2022年，星期四 半胱氨酸残基上的巯基是许多酶的必需基团。低浓度的重金属离子(Hg2+、Ag2+、Pb2+等)及As3+等可与巯基酶分子中的巯基结合，使酶失活。 第103页，共160页，编辑于2022年，星期四 第104页，共160页，编辑于2022年，星期四 第105页，共160页，编辑于2022年，星期四 2．底物类似物可共价地修饰酶的活性中心 与基团特异性抑制剂不同，底物类似物与底物的结构相似，可特异地与酶的活性中心共价结合，不可逆地抑制酶的活性。此类抑制剂可作为亲和标记物，用来定性酶活性中心的功能基团。 第106页，共160页，编辑于2022年，星期四 酶的自杀性抑制剂可以作为酶的底物与酶活性中心相结合，生成酶-底物复合物，并接受酶的催化作用。然而，经催化后的中间产物不游离出产物，而是转化为酶的抑制剂，进一步与酶活性中心共价结合，对酶产生抑制作用。 E + S ES ??? E·I ??? E-I 3．自杀性抑制剂是经过修饰的酶的底物 第107页，共160页，编辑于2022年，星期四 + 酶-底物复合物 无活性酶中 被修饰的FAD ? N，N-二甲基丙炔酰胺 自杀性抑制剂N,N-二甲基丙炔酰胺在被单胺氧化酶氧化后，由于填加1个质子，使之与酶的辅基FAD结合生成稳定的烷化物，从而酶被抑制。 单胺氧化酶通过其辅基FAD氧化N,N-二甲基丙炔酰