生化课件7.6第六节影响酶反应速率的因素.pptxVIP

第六节 影响酶反应速率的因素;底物浓度对反应速率的影响 米氏方程 酶浓度对反应速率的影响 当反应系统中底物的浓度足够大时，酶促反应速度与酶浓度成正比，即ν=k[E]。 pH对反应速率的影响 钟形曲线； 酶的最适pH不是酶的特征性常数。 温度对反应速率的影响 酶的最适温度与实验条件有关，故它不是酶的特征性常数 激活剂对反应速率的影响 酶的激活剂大多数是金属离子，如K+、Mg2+、Mn2+等， 唾液淀粉酶的激活剂为Cl-。 抑制剂对反应速率的影响： 不可逆抑制作用 可逆抑制作用（竞争性、非竞争性、反竞争性）;一.底物浓度的影响;对于简单的酶反应，当酶浓度和其他条件恒定时：;Michaelis-Menten的三个假设;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;最大反应速率 在一定酶浓度下，酶对特定底物的最大反应速率Vmax也是一个常数。 受pH、温度和离子强度等因素的影响而变化;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;(二) 米氏方程;二. 酶浓度对酶反应速度的影响;三. pH对酶反应速度的影响 ;三. pH对酶反应速度的影响 ;温度对酶反应速度的影响具有双重性：;四. 温度对酶反应速度的影响;五. 激活剂对酶反应速度的影响;五. 激活剂对酶反应速度的影响;抑制作用：有些物质与酶结合后，引起酶的活性中心或必需基团的化学性质发生改变，从而使酶活力降低或丧失。;引起抑制作用的物质称为抑制剂。抑制剂具有专一性。; 依据抑制剂与底物的关系，可逆抑制作用可分为三种类型： 1. 竞争性抑制作用 2. 非竞争性抑制作用 3. 反竞争性抑制作用 ?; 某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争酶的活性中心并与之结合，从而减少了酶与底物的结合，因而降低酶反应速度。这种作用称为竞争性抑制作用。;(一）可逆抑制作用;例如，丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。 这种抑制作用可通过增加底物浓度而使整个反应平衡向生成产物的方向移动，因而能削弱或解除这种抑制作用。?;(一）可逆抑制作用;竞争性抑制中， Vmax不变， Km增大;Linerweaver-Burk plot of competitive inhibition; 某些抑制剂结合在酶活性中心以外的部位，因而与底物和酶的结合无竞争，即底物与酶结合后还能与抑制剂结合，同样抑制剂与酶结合后还能与底物结合。但酶分子上有了抑制剂后其催化功能基团的性质发生改变，从而降低了酶活性。这种作用称为非竞争性抑制作用。 ;2. 非竞争性抑制作用;2. 非竞争性抑制作用;2. 非竞争性抑制作用;3. 反竞争性抑制作用;(二）不可逆抑制作用;常见的不可逆抑制剂：; 有机磷化合物 可使-OH磷酯化，所以它是活性中心有Ser残基的酶的抑制剂。 常见的有机磷农药，如敌敌畏、敌百虫，它们杀灭昆虫的机理就在于可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，该酶的作用是将神经递质乙酰胆碱水解，若它被抑制，会导致乙酰胆碱的积累，使神经过度兴奋，引起昆虫的神经系统功能失调而中毒致死。;1.?关于pH对酶活性的影响，正确的是 (A)影响酶的必需基团的解离状态 (B)也能影响底物的解离状态 (C)酶在一定的pH范围内发挥最高活性 (D)pH改变能影响酶的Km值 2. 有机磷毒剂能使胆碱酯酶失活，这是 (A)竞争性抑制 (B)非竞争性抑制 (C)反竞争性抑制 (D)不可逆抑制;3. 某一酶促反应动力学符合米氏方程，若［S］=1/2 Km，则v= Vm；当酶促反应速度(V)达到最大反应速度(Vm)的80%时，底物浓度［S］是Km的 倍。 4. 以丙酮酸为底物的丙酮酸脱羧酶Km＝4×10-4摩尔/升，在该酶的反应系统中丙酮酸的浓度为3.6mM，则该酶催化丙酮酸脱羧反应的速度达到最大反应速度的 % 。 ;5. 某酶的催化反应：式中K1=1×107M-1S-1，K-1=1×102S-1，K2=3×102S-1，则Km = 。 6. 影响酶促反应速度的因素有 、 、 、 、 和 。;7. 测定一酶液总蛋白含量为60%（W/V），取0.5 mL酶液在标准条件下测定，最初底物浓度为3mol/L，催化反应20分钟后，底物浓度为2.7mol/L，此时，酶促反应速度达最大速度的70%，已知反应体系的总体积为100ml，问： （1）?可用何种方法测定酶液中蛋