第八章 蛋白表达系.pptVIP

2.常用酵母表达系统(宿主-载体系统) （1）酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达系统 （2）甲醇营养型酵母表达系统? （3）裂殖酵母(Schizogenesis pombe)表达系统 第30页，共48页。 （1）酿酒酵母表达系统 酿酒酵母本身含有质粒，其表达载体可以有自主复制型和整合型两种。 第31页，共48页。 自主复制型质粒 自主复制型质粒通常有30个或更多的拷贝，含有自动复制序列(automaticreplicating sequence，ARS)，能够独立于酵母染色体外进行复制 ，这些质粒往往不稳定。 第32页，共48页。 整合型质粒不含ARS 整合型质粒不含ARS，必需整合到染色体上，随染色体复制而复制。整合过程是高特异性的，但是拷贝数很低。为此，人们设计了pMIRY2(for multiple integration into ribosomal DNin yeast)质粒，旨在将目的基因靶向整合到rDNA簇上(rDNA簇为酵母基因组中串联存在的150个重复序列)，因此利用pMIRY2质粒可以得到100个以上的拷贝。 第33页，共48页。 酿酒酵母表达的外源蛋白质往往被高度糖基化，糖链上可以带有40个以上的甘露糖残基，产物的抗原性明显增强。所以，酿酒酵母常常用来制备亚单位疫苗(如HBV疫苗、口蹄疫疫苗等)。 第34页，共48页。 第