大豆磷脂酰胆碱，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰肌醇的检测——waters hilic方法.pdfVIP

大豆磷脂酰胆碱，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰肌醇的检测 ——Waters Hilic 方法 参考标准: GBT21493-2008 大豆磷脂中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定 使用waters Hilic 色谱柱，已乙腈，水为流动相，2695-2489 系统检测大豆磷脂中的磷脂 酰胆碱PC、磷脂酰乙醇胺PE、磷脂酰肌醇PI。方法样品前处理简单，使用反相流动相，不 需正反相间的切换，也不需使用正相脱气包，达到GBT21493-2008 检出限要求，方法重现性， 回收率，样品残留测试均达到方法要求。 可用于粮油企业中大豆磷脂中的PI，PC，PE 快速测定。 1. 稀释液: 异丙醇:正己烷=1:1 2. 标样配制方法： 方法1：若磷脂酰肌醇PI 标样纯度为50%，需分开配制PI 标样与PC/PE 混合标准溶液。 准确称取20mg PI 标准品，用稀释液定容于10mL 容量瓶中，制得 1mg/mL PI 储备液 C0，逐级稀释，获得0.025—0.5mg/mL 系列PI 标准溶液。 准确称取10mg PE 与PC 标准品，用稀释液定容于10mL 容量瓶中，制得 1mg/mL PE 与PC 储备液，逐级稀释，获得0.025—0.5mg/mL 系列PE，PC 混合标准溶液。 （PC 响应较高，可适当降低浓度） 举例配制如下： 移液枪配制方法：使用色谱小瓶配制 稀释液体积 —— 800uL 900uL 800uL 900uL 900uL 标样体积 —— 800uL C0 300uL C0 200uL C1 100uL C1 100uL C2 浓度mg/mL 1 0.5 0.25 0.1 0.05 0.025 浓度C C0 C1 C2 C3 C4 C5 容量瓶配制方法：使用10mL 容量瓶配制 稀释液体积 —— 定容至10mL 容量瓶 标样体积 —— 5mL C0 5mL C1 1mL C0 1mL C1 1mL C2 浓度mg/mL 1 0.5 0.25 0.1 0.05 0.025 浓度C C0 C1 C2 C3 C4 C5 方法2：若磷脂酰肌醇PI 标样纯度98%，可配制PI，PC，PE 三种标样混合标准溶液。 准确称取10mg PI，10mg PE, 10mg PC 标准品，用稀释液定容于10mL 容量瓶中，制得 1mg/mL 混标储备液，逐级稀释，获得0.02—0.5mg/mL 系列标准浓度。 3. 样品配制方法： 准确称取约500mg 样品，用稀释液定容至100mL，溶解混匀后，0.45um 滤膜过滤上样。 4. 仪器方法： 色谱柱： Waters XBridge Hilic 5um ， 4.6 ×150mm Column， PN：186004453 柱温：35 摄氏度 流动相：B：乙腈， C ：纯水 进样体积： 10uL 波长：205nm 运行时间：11min 时间 流速 mL/min B% C% 曲线 0 1 95 5 6 1 1 95 5 6 6 1