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稳定性氢同位素分析在牛肉产地溯源中的应用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：稳定性氢同位素分析在牛肉产地溯源中的应用 1 1 引 言 1 2 实验部分 2 3 结果与讨论 3 文2：关于桥梁稳定性在悬臂施工中的分析 5 1 施工控制的必要性 6 2 悬拼桥梁的设计和施工特点 6 3 悬拼桥梁墩台和梁部支撑的稳定性和可靠性控制 7 4 施工控制方法 8 5 结语 9 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 稳定性氢同位素分析在牛肉产地溯源中的应用 文1：稳定性氢同位素分析在牛肉产地溯源中的应用 1 引 言 随着食品生产和贸易的全球化发展，以及食品安全事件的频繁发生，各国政府、食品监管部门和消费者日益关注食品的产地来源。高精度的稳定性同位素天然丰度分析是目前被认为追溯食品产地来源的一项有效技术。生物体中稳定性碳、氮同位素测定方法比较成熟，测定结果比较稳定，常用于植源性食品的掺假鉴别和来源鉴别，以及动物膳食和营养级的研究。20世纪90年代，随着疯牛病、口蹄疫、禽流感等动物疫病疫情的不断发生，有学者相继将稳定性同位素分析技术用于奶制品，包括鲜奶[1，2]、奶酪[3～5]、黄油[6]和肉制品，包括牛肉[7～10]、羊肉[11，12]、猪肉[13]和鸡肉[14]的产地溯源研究。但目前，稳定性氢同位素用于动物食品产地溯源的研究还比较少[12，15]。这主要由于生物体中稳定性氢同位素测定方法还不成熟，而且生物体中部分氢不断与周围环境的水中的氢发生交换。本研究利用高温热解炉与同位素比率质谱仪联用测定牛组织中氢同位素比率，分析了测定方法的稳定性和精确性，并分析了我国不同地域来源牛组织中稳定性氢同位素组成差异，探讨了稳定性氢同位素组成用于我国牛肉产地溯源的可行性。 2 实验部分 实验材料 从吉林省榆树市、贵州省安顺市、宁夏自治区同心县和河北省张北县4个地点共采集了61头牛的牛肉样品和对应的牛尾毛样品。采样点的具体情况见表1。表1 样品来源地及当地饮水中年平均δ2H值 实验方法 采样方法 牛肉：屠宰后在每头牛的后臀部取500 g肉，装入自封袋中在-20 ℃冰箱中冷冻保藏;牛尾毛：在每头牛的尾部紧贴皮层剪取1 cm2牛尾毛，用细线系住根部，装入自封袋中冷冻保藏。 样品前处理 牛肉：取50 g牛肉样品冷冻干燥后，加入沸程为60～90 ℃的石油醚，采用索氏提取器进行脱脂处理[7]。脱脂后的牛肉粉进行研磨，备用。牛尾毛：剪取靠近根部4 cm的牛尾毛样品，用去离子水浸泡清洗，在60 ℃恒温干燥12 h，用氯仿甲醇(2∶1， V/V)混合液浸泡2 h进行脱脂，用去离子水清洗、浸泡30 min，再用氯仿甲醇 (2∶1， V/V)混合液浸泡。最后用去离子水清洗、60 ℃干燥，剪成1～2 mm备用[9，10] 稳定性氢同位素比率测定 称取1 mg样品装入银杯中(高6 mm， 直径4 mm)，每个样品重复3次。将银杯按照顺序放在酶联免疫板中，盖上盖子，在实验室的室温环境下平衡72 h。然后包裹样品，并把其装入与高温热解炉相连的旋转自动进样盘中。高温热解炉内的柱子是由装有玻璃碳细片的Al2O3管组成，测定样品时热解柱的温度为1280 ℃，与其相连的气相色谱柱(GC)的温度为85 ℃。气相色谱柱中装有5 nm的分子筛柱，用于把高温裂解生成的H2和CO气体分离。H2在载气He气的载带下经过稀释仪，最后进入Thermo Finnigan DELTAPlus XP同位素比率质谱仪(IRMS)进行检测。载气氦气流量为80 mL/min。 He稀释压力为50 kPa，H2参考气压力为50 kPa。测定时用酪蛋白标准品(Casein IHR)作为内标准物，并用胶原蛋白标准品(Collagen ICM)和牛肝脏标准品(NIST 8414)检测仪器的精确度。稳定性氢同位素比率以δ2H(‰)表示，δ2H的相对标准为VSMOW。计算公式为：δ(‰)=(R样品/R标准-1)×1000其中，R为轻同位素与重同位素丰度比，即2H/1H。 3 结果与讨论 氢同位素检测结果重复性和精确度分析 以酪蛋白标准品(Casein IHR)为内标物做标准曲线，对胶原蛋白标准品(Collagen ICM)和牛肝脏标准品(NIST 8414)中的氢同位素测定结果进行校对。从表2可知，6个胶原蛋白和牛肝脏标准品中氢同位素比率的标准偏差均很低，分别为‰和‰，这说明测定结果的稳定性很好。胶原蛋白和牛肝脏标准品中氢同位素的测定结果与可接受值比较可以看出，两者差异很小，分别为‰和‰，这说明测定结果的准确性很高。由此可见，本方法可直接用于有机体中氢同位素比率的测定，