大鼠血浆中COVID-19潜在治疗药物的检测方法发明专利.pdfVIP

大鼠血浆中COVID-19潜在治疗药物的检测方法 技术领域 本发明涉及药物分析领域，具体涉及大鼠血浆中COVID-19潜在治疗药物的检测 方法。 背景技术 2019 年末，由2019 新型冠状病毒(2019-nCoV)感染导致的新型冠状病毒肺炎 (CoronaVirusDisease2019 COVID-19) ， 疫情暴发。该病毒传播迅速，传染性强，人群 普遍易感，疫情很快成为全球关注的焦点，而在全球范围内，尚无批准的针对 COVID-19 的治疗方法，抗新冠病毒药物的研发迫在眉睫。 30 根据已上市药物以及相关的数据库进行了药物筛选，迅速发现了 种可能对 COVID-19有治疗作用的药物，其中包括瑞德西韦(remdesivir)、沙奎那韦(Saquinavir)、 洛 匹那 韦(Lopinavir) 、卡非佐米(Carfilzomib) 、利托那 韦 以及磷酸氯 喹 (ChloroquinePhosphate)等药物，此类药物大多可以阻止病毒RNA 合成以抑制病毒复 制，相关细胞水平的试验表明此类药物可以有效的在细胞水平上抑制COVID-19 的感 染，但其在人体上的作用还有待临床验证。根据国家食品药品监督管理总局规定，新 药在临床验证前需相应的非临床试验数据支持。因此，有关针对COVID-19潜在治疗 药物的非临床安全评价工作尤为重要，其在不同动物模型中药物代谢以及毒理的方法 准确性是其在进入临床试验中的重要安全保障。 目前，针对新冠病毒的相关潜在治疗药物主要是小分子药物，而小分子药物 分子( 200 700) 量 ～ 的代谢常用色谱法进行测定，方法开发过程中主要对所使用的溶剂和试 剂、基质以及配制和处理步骤进行筛选，从而形成精确测定的方法。因此，COVID-19 潜在治疗药物临床前检测方法的开发至关重要。 发明内容 本发明提供一种大鼠血浆中COVID-19潜在治疗药物的检测方法。本发明的方法 能够快速、简便地检测大鼠血浆中COVID-19潜在治疗药物。 本发明是通过以下方案来解决技术问题的： 一种大鼠血浆中COVID-19潜在治疗药物的检测方法，其包含以下步骤： 采用液相色谱 质谱联用法，对经处理的大鼠血浆进行分析检测，即可；- 所述大鼠血浆的稳定剂为敌敌畏； 所述 COVID-19 潜在治疗药物为(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并 [2,1-f][1,2,4] -7- )-5- -3,4- -2- ) )( ) ) ) 三嗪 基 氰基 二羟基四氢呋喃 基 甲氧基 苯氧基磷酰基 氨基 -2- 丙酸 乙基丁基酯。 本发明中，所述大鼠血浆是指仅添加稳定剂的大鼠血浆；经过处理的大鼠血浆成 为经处理的大鼠血浆。本发明中，所述大鼠血浆一般是指大鼠EDTA-K2 血浆。 SD 本发明中，所述大鼠可为 大鼠。 - 20 30℃ 本发明中，所述液相色谱 质谱联用法中的液相色谱的柱温较佳地为 ～ ， 例如25℃。 - 1 10μL 本发明中，所述液相色谱 质谱联用法中的液相色谱的进样量可为 ～ ，例如 2μL。 本发明中，较佳地，所述经处理的大鼠血浆采用蛋白沉淀法对所述大鼠血浆进行 处理。所述蛋白沉淀法采用的蛋白沉淀剂较佳地为甲醇或乙腈。 其中，所述处理可包括：将所述大鼠血浆、内标物和所述蛋白沉淀剂混合后，取 上清液即可。 —— 1 —— 所述内标物可为甲苯磺丁脲。