乳腺癌组织中缺氧诱导因子1α的表达.docVIP

乳腺癌组织中缺氧诱导因子1α的表达 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：乳腺癌组织中缺氧诱导因子1α的表达 1 1 资料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2：大肠腺瘤及癌组织中缺氧诱导因子1α的表达及临床意义 6 1 资料与方法 6 2 结果 7 3 讨论 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 11 正文 乳腺癌组织中缺氧诱导因子1α的表达 文1：乳腺癌组织中缺氧诱导因子1α的表达 Expression of Hypoxiainducible Factor1 Alpha(HIF1α) in Human breast Carcinoma Key words：breast carcinoma; Hypoxiainducible factor 1 alpha (HIF1α); Tumor cell proliferation 缺氧诱导因子1（hypoxiainducible factor1）是缺氧条件下肿瘤细胞产生的一种核转录因子，调节细胞适应低氧状态下的能量代谢和氧的运输，是体内维持细胞内氧平衡的主要调控因子[1]。HIF1在肿瘤血管生成方面研究较多，而与肿瘤细胞增殖的关系目前国内未见报道。我们采用免疫组化方法检测乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织及乳腺癌组织中HIF1α含量，并分析与增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen， PCNA）的指数、腋窝淋巴结转移、雌激素受体状态及组织学分级等的关系，旨在探讨HIF1α在乳腺癌的生长、不同细胞增殖和侵袭转移中的作用。 1 资料与方法 一般资料 选取1995年4月～1998年12月郧阳医学院附属太和医院经病理证实的手术切除标本， 20例乳腺纤维腺瘤， 20例普通乳腺增生组织， 80例乳腺癌。 患者均为女性， 年龄29～72岁， 平均岁， 中位数年龄47岁。 所有患者术前均未接受放化疗。 乳腺癌组织学分类为导管内原位癌20例， 浸润性乳腺癌60例， 浸润性乳腺癌分为高分化30例， 低分化30例； 雌激素受体（ER）阳性48例， 阴性32例； 孕激素受体（PR）阳性43例， 阴性37例； 腋窝淋巴结阳性45例， 阴性35例； 肿瘤直径 45例， 主要试剂 鼠抗人HIF1α单克隆抗体购自Neomarker公司，鼠抗人单克隆抗体PCNA、SP试剂盒及DAB显色剂购自福州迈新公司。 实验方法 标本经10%福尔马林溶液固定，常规脱水包埋，每一例病理标本均作厚度4μm的连续切片3张，分别进行HE染色和免疫组化染色。单克隆抗体HIF1α的工作浓度1∶40，单克隆抗体PCNA为即用型试剂。HIF1α、PCNA蛋白表达检测采用SP染色法，参照SP试剂盒说明书进行。PBS代替一抗作阴性对照，用已证实的阳性乳腺癌切片作阳性对照。 染色结果判定 光镜下HIF1α蛋白以细胞核内有棕黄色颗粒为阳性，由于HIF1α存在于细胞核中，仅少数胞浆着色的细胞记为阴性。细胞核内出现棕黄色颗粒为PCNA阳性细胞，每例标本高倍镜（×200）下记数1000个细胞核，阳性细胞25%记为高表达（++），1％～25%记为低表达（+） 统计学方法 采用SPSS 统计分析软件进行χ2检验、Spearman等级相关分析。 2 结果 HIF1α蛋白的表达 HIF1α阳性反应物为棕黄色颗粒，主要位于肿瘤细胞的胞核中，HIF1α在乳腺癌及相关组织中的表达，见表1。乳腺纤维腺瘤、普通增生组织中未见HIF1α的表达；原位癌中阳性率55%（11/20），高分化浸润癌中%（22/30），低分化浸润癌中%（29/30）。肿瘤坏死边缘区域HIF1α的阳性表达增多，同时我们观察到在62例HIF1α的阳性病例中有48例有坏死灶，坏死灶周边的细胞着色特别强。偶尔在邻近浸润癌灶的导管增生或非典型增生中发现少数几个HIF1α着色细胞。χ2检验分析显示HIF1α的表达在纤维腺瘤（0/20），普通增生组织（0/20），导管原位癌DCIS（11/20），浸润性乳腺癌（51/60）之间有显著差异性（），低分化浸润癌与导管原位癌之间有显著差异（P PCNA及HIF1α的表达与临床病理因素、生物学指标之间的关系 PCNA表达在细胞核，呈明显的小颗粒或粗颗粒状，分布不均匀，浸润癌中明显高于原位癌，乳腺癌总体强阳性表达（++）率为75%（60/80），其中原位癌为65%（13/20），浸润癌为%（47/60）。对照组乳腺纤维腺瘤、普通增生组织中部分导管上皮细胞见弱阳性表达，均为弱表达（+）。HIF1α与临床病理因素及生物学指标之