免疫分析法课件.pptVIP

* * 【练习与思考】 1、简述免疫分析法的基本原理及应满足的基本条件？ 2、简述抗原－抗体反应的特点及方法的分类？ 3、简述均相免疫分析和非均相免疫分析？ 4、简述F与B的分离方法？ 5、简述酶免疫分析中常用到的标记酶及相关的酶底物？ 6、简述酶联免疫吸附测定的基本原理与操作？ 免疫分析法ppt课件全文共95页，当前为第95页。 * * 四、标准曲线的制备与样品测定步骤 免疫分析法ppt课件全文共95页，当前为第63页。 * * (一)标准曲线的绘制 取标准抗原，用无放射活性的空白血清或血浆稀释成5－8个系列浓度。 加入定量标记抗原，其总放射性(T)应能满足准确测量的需要。 加入定量的已稀释好的特异抗体，其抗体的量应满足灵敏度的要求。 将标准抗原、标记抗原、特异抗体与缓冲液混匀后，在适当条件下温育，待反应平衡后测定总计数率(T)。 免疫分析法ppt课件全文共95页，当前为第64页。 * * 加入分离剂，使结合部分(B)与游离部分(F)分离。 测定各管结合部分或游离部分的计数率。 标准曲线通常以标准抗原(待测药物标准品)的浓度为横坐标，以结合率(B％)为纵坐标作图。 纵坐标B％的计算有两种方法：一种是将与抗体结合的标记药物的放射性强度(B)与加入的标记药物总放射性强度(T)比较，即B％=(B／T)×100％；另一种是用零标准管(不加药物标准品)的放射性强度B0代替T比较，