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骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤 1 1　　材料和方法 2 1　　试剂与仪器 2 2　　结　　果 5 3　　讨　　论 6 文2：骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤 7 1 材料和方法 8 1 试剂与仪器 8 2 结 果 11 3 讨 论 12 参考文摘引言： 14 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤 文1：骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤 〔Abstract〕　　Objective　　 To investigate the methods that how the MSCs wok on the spinal cord injury. And try to find the ways to plant MSCs.　　Methods　　 The MSCs were traplanted into the spinal cord of SCI　　modles. Before the traplanting， the MSCs were trafected with weeks after traplantation， MSCs difference were observed， SPECT， immunohistochemistry and angiogenesis were observed to detect the effects on spinal cord.　　 Results　　 This experiment obtained the high pure MSCs. The MSCs can stabilize to spread the generation to combine the cord.　　 Conclusion　　 The traplantation using the cells proved that MSCs was very useful in the recovery of spinal cord injury Which may allow us to rebuild those conditio to repair and regrow the spinal cord。 〔Key Words〕　　Mesenchymal stemcells; Traplante; Spinal cord injury; Culture of cell 脊髓损伤的修复是近年热点课题。骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells， MSCs）由于具有较强的增殖能力和多向分化潜能，可用来作为细胞移植的供体细胞来源[1]。本实验通过将 MSCs 移植于损伤的脊髓，研究其在缺血微环境下的分化增殖潜能以及其对于脊髓损伤的作用。 1　　材料和方法 1　　试剂与仪器 IMDM（I scove somdified Dulbecco smedium）， Gibco 公司；胎牛血清（FBS）Hyclone 公司；分离液，胰蛋白酶和 EDTA；可吸收性明胶海绵，南京第三制药厂；戊巴比妥钠，佛山市化工实验厂；% 乳酸环丙沙星，北京双鹤制药厂；乳酸钠林格氏液，北京双鹤制药厂；FLUOROGOLD，FLOROCHROME 公司；FLUOROGOLD，FLROCHROME 公司；PHA-L 单抗，兔源性；牛血清白蛋白，SIGMA 公司；生物素化羊抗兔 IgG，SIGMA 公司；EXTRAVIDIN PEROXIDASE，SIGMA 公司；DAB，SIGMA 公司；TRITON X-100，SIGMA 公司；葡萄糖氧化酶，SIGMA 公司。实验动物，3~4 周龄的 SD 大鼠，雌雄不限，由中山大学动物实验中心提供。 方法 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及标记　　将 SD 大鼠颈椎脱臼处死后，75% 酒精浸泡 5 min，无菌条件下取下肢长骨，显露骨髓腔，用含15% 胎牛血清的 IMDM 培养液冲洗骨髓腔获取骨髓细胞，将冲洗液收集于离心管中，2 000 min 离心 15 min，弃上清及脂肪层，取沉淀，用 IMDM 培养液混匀，轻轻地层加到比重为 1 077 g/mL 的淋巴细胞分离液上，2 000 min 离心 10 min，收集中间的单核细胞层。