医疗器械无菌检查操作规程.pdfVIP

1.目的 建立无菌检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。 2.适用范围 本规程适用于本公司质管部对本厂生产的一次性微波消融针的无菌检测。 3.职责 质量部负责实施。 4.内容 检验依据 产品注册标准 《中华人民共和国药典2015 年版》 无菌检查法 仪器、设备 超净工作台、电热干燥箱、恒温培养箱、压力蒸汽灭菌器、集菌仪、电子 天平、PH 计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、三角烧瓶，接种环、镊子，试管 架，大试管若干等。 培养基及稀释液 需气菌、厌气菌培养基：硫乙醇酸盐流体培养基； 霉菌培养基：大豆酪蛋白肉汤培养基； 培养基的无菌性检查 每批配制的培养基均应进行无菌性检查（可与产品无菌检验同步进行）。 检查时，每批培养基随机取不少于 5 支（瓶）培养 14 天，应无菌生长； 稀释液 氯化钠-蛋白胨缓冲液，9g/L 无菌氯化钠溶液； 无菌检验室的环境要求 （1）无菌检验应在环境洁净度 10000 级下的局部百级的单向流空气区域内进 行。 （2）缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压，阳性对照 室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于 10Pa。无菌检验室的室温应保持 18～26℃，相对湿度：45～65%。 （3） 无菌检验室的单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净 室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行悬浮粒 子、浮游菌和沉降菌的监测。 （4） 无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数：每次操 作时在层流空气所及台面的左中右置 3 个 TSA 琼脂平板，暴露 30min，于 30～ 35℃培养 48 小时，菌落数平均应不超过 1CFU/平板。 无菌检验前的准备 器具灭菌、消毒 可经压力蒸汽灭菌器内 121℃蒸汽灭菌 30 分钟后使用。 人员、物料进入无菌检验室 开启紫外线灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理，消毒时间不得少于 30min。 物料进入无菌检验室流程 进入无菌操作室的所有培养基、供试品等的外表都应采用适用的方法进 行消毒处理，以避免将外包装污染的微生物带入无菌检验室。 人员进入无菌检验室流程 （1） 更鞋脱衣：在一更区脱去一般区工作鞋，穿上无菌检验室工作鞋；脱去 一般区工作服。 （2）洗手：首先用洗手液在手上揉擦出泡沫，再用流水连续冲洗20 秒，洗净 泡沫。 （3）更衣：在二更区按照要求穿衣，要求裤子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽 子包裹所有头发。 （4）手消毒：用消毒液浸泡双手5 秒以上或用浸过消毒液的棉球擦拭双手。消 毒液可用洗必泰、新洁尔灭、碘伏、75%酒精等。 （5）人员进入：经缓冲间进入无菌检验室。 无菌检验操作要求 （1）全过程必须严格执行无菌操作，防止微生物污染。 （2）使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物扩散。 （3）所有操作不得有大幅度或快速动作，以免搅动空气中的尘埃微粒。 （4） 使用金属接种器具时，用前、用后均需灼烧灭菌。 （5） 在接种培养物时，动作应轻、准，防止培养物溅出，产生汽溶胶，造成 污染。 （6）操作过程中所有的带菌物品，用后均应作消毒、灭菌处理。在检验完成后 经传递窗传至一般区，立即用压力蒸汽灭菌锅 121℃灭菌 30 分钟。 对照菌液制备 无菌检验所用的菌株传代次数不得超过 5 代。 取金黄色葡萄球的普通琼脂斜面培养物，接种金黄色葡萄球至 TSA 琼脂培养基 内，在30～35℃培养 18～24h 后备用，同时制备%氯化钠溶液加入在 6 支小试 管内，每支试管内加的%氯化钠溶液，在压力锅内经 121℃灭菌 30min 备用。将 已配好的金黄色葡萄球菌培养菌液取加入第一支小试管内，稀释成浓度 1:10 的 菌液；取第一支试管内 l 菌液加入第二支小试管内，稀释成浓度 1:100 的菌 液，同法稀释成浓度 1:10-6 （每ml 含菌量≤100CFU）即可。 采用平皿计数法测定活菌数。 .试验方法 供试液准备 优先采用将供试品或其有代表性的各部分直接投放入培养基内培养的方 法，如供试品不适宜直接投放，可按下列方法制备供试液，应使浸提介质充分 洗提供试品的浸提表面，供试液制备应按无菌操作法进行，在制备后 2 小时内 使用。 根据供试品具体特性选择下列方法： 2 a) 管类器