安捷伦(agilent 1260)高效液相色谱仪操作规程.pdfVIP

1.目的：规范Agilent 1260 高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。 2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260 高效液相色谱仪的维修、保养。 3.有关责任：化验室精密仪器室 4.引用标准：仪器说明书及Agilent 化学工作者现场操作培训教材 5.规程内容： 5.1 开机前准备 5.根据实验要求配制流动相，须μm 滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用 前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A （装 有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）μm 滤膜过滤。 5.若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3 滴的速度虹吸10%的异丙醇 水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。 5. 5.打开计算机,进入 Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。 5.待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1 联机”图标，将自动进入化 学工作站画面。 5.从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左 侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。 5.打开 Purge 阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定 泵”选项进入泵编辑画面。 5.设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A 通道设到100%，单击“确定”。 5.单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单 击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止； 切换B通道(B通道设到 100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为 止。(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。) 5.将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%， B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至 方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。 5.单击泵下面的瓶图标，输入溶剂瓶A、B 内流动相的实际体积（为保护泵 和色谱柱，请按实际体积输入）和停泵的体积单击“确定”，如果各溶剂瓶 溶剂体积小于停泵体积，泵将自动停止。 5.把缓冲液（用于柱子过渡的，与流动相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10% 的水溶液）换成流动相，排气后，逐步增加至所需流速，待柱压基本稳定 后，打开检测器等，观察基线情况。 5. 采集方法编辑 .1编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据 分析”外的三项，单击“确定”进入下一画面。 5.3.1.2方法信息：在“方法注释”栏中加入（如方法的用途等），单击“确 定”进入下一画面。 5.3.1.3 泵参数设定：在“流速”处输入方法所需流量（如 1ml/min）；默认 为A为100%，如需二元高压，在“溶剂B”处输入所需比例,则溶剂A=100-B ， 也可“插入”一行“时间表”编辑二元梯度；在“压力限”处输入柱子的 最大耐高压（建议设定200bar ）以保护柱子,单击“确定”进入下一画面 。 5.3.1.4 VWD 检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波 长，如 254nm ；在“峰宽(响应时间) ”下方点击下拉式三角框,选择合适的 响应时间（如0.1min (2s) ）；如有特殊要求，也可在“时间表”中可以“插 入”一行输入随时间切换的波长（如1min 波长=300nm ），点击“确定”。 5.3.1.5 在“运行时选项表”中选中“数据采集”选项，单击“确定”。 5.3.1.6 单击“方法”菜单选中“方法另存为”输入方法名，单击“确定”。 5.3.1.7 从“视图”菜单中选中“在线信号”,选中“信号窗口 1”,然后单击 “改变”钮,将所要查看的信号移到右边框中,单击“确定”。 5.3.1.8 进样器参数设定：在进样模式中输入“进样量”xx μl ，默认为20 μ l 。“标准进针”只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“针清洗后进样” 可以输入进样体积和洗瓶位置为xx ，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗 瓶中洗针。 进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函 数即可按程序进样。 5.3.1.9 TCC 检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度， 并选中它，右侧选中“与左侧相同”——使柱温箱的温度左右一致。 运行方法 .1 单针进样 选择“单针进样”图标。 点击画面中的“开始”运行方法，中间停止采样点“结束”。 .2 序列进样 “序列”下“序列参数”，设置同单针进样，样品位置不填。 “序列”