白酒中甜蜜素的LC-MSMS分析方法测定.docxVIP

PAGE 1 白酒中甜蜜素的LC-MS/MS分析方法测定 摘 要： 本文采用QSight LC-MS/MS正负离子切换快速检测食品中的甜蜜素，定量限至0.05 mg/kg，标准曲线线性回归系数≥0.999。采用白酒基质作为加标样品，平行8个样品测试方法的回收率和方法重现性，在加标浓度为0.1 mg/kg下，平均回收率≥ 99.42%，方法重现性≤ 2.29%本方法快速，简便，准确。 背景 甜蜜素，化学名称叫环己基氨基磺酸钠，作为一种最常用的甜味剂，被广泛应用于食品中。消费者如果经常食用甜蜜素含量超标的饮料或其它食品，就会因摄入过量对人体的肝脏和神经系统造成危害。因此，在实际使用时需要严格控制其添加量。目前世界上对甜蜜素的安全性仍存在争议。世界上有包括美国、日本等国在内的40多个国家仍规定禁止使用甜蜜素作为食品甜味剂。但另有中国、欧盟、澳大利亚、新西兰等80多个国家均允许在食品中添加甜蜜素。 我国的食品添加剂标准主要是国标《GB 5009.97- 2016 食品安全国家标准食品中环己基氨基磺酸钠的测定》，该标准是针对食品中甜蜜素的通用检测方法。其中，由于酒类基质干扰大，所以采用第三法-LCMSMS测定甜蜜素，采用正负离子切换同时检测的方式，排除了杂质干扰，提高了检测灵敏度，定量限为0.05 mg/kg（标准中为0.1 mg/kg）。本文采用QSight LCMSMS建立酒类样品品中甜蜜素检测的解决方案，本方法快速，简便，准确。 样品前处理方法[1] 称取酒样10.0g,置于50mL烧杯中,于60℃水浴上加热30min,残渣全部转移至100mL容量瓶中,用水定容并摇匀,经0.22μm 水相微孔滤膜过滤后备用。 LC-MS/MS方法 3.1 仪器型号：PerkinElmer QSight220TM 液相色谱串联质谱仪 3.2 液相色谱参数： 色谱柱：Brownlee SPP C18，100 mm*2.1 mm，2.7 μm 柱温：35 ℃ 流动相：A：水（含0.1 %甲酸）；B：乙腈， 流速：0.3 mL/min 运行时间：4 min 梯度洗脱：等度洗脱，A/%：80%，B/%：20% 3.3 质谱参数： 表1 化合物质谱参数 序号 化合物 英文名称 CAS No. 保留时间/min MRM离子对 EV/V CC/eV 1 甜蜜素 Sodium N-cyclohexylsulfamate 68476-78-8 2.51 201.8/122.2(ESI+) 10 -12 177.8/79.9*(ESI-) -30 36 备注：* 为定量离子对 离子源质谱参数： 离子源模式：电喷雾离子源（ESI） 反吹气：100 雾化气：180 离子源温度：400 ℃ 离子源喷雾电压：+5000 V（ESI+）/-5000v（ESI-） 实验结果 甜蜜素的提取离子色谱图如图1所示，正负离子通道的灵敏度都完全满足要求。 图1. 甜蜜素的正负离子同时采集的提取离子色谱图（10ng/mL） 甜蜜素化合物的曲线线性请见表2所示，标准工作曲线的浓度梯度为：5，10，25，50，100 ng/mL。图2为甜蜜素的标准曲线图。范围内具有良好的线性（R2 ≥ 0.999）；最低定量限为0.05 mg/kg，完全符合残留检测要求。 表2. 甜蜜素化合物的标准曲线及LOQ 序号 化合物 线性范围(ng/mL) 线性方程 相关系数R2 LOQ (mg/kg) 1 甜蜜素 5-100 y=28864x + 16873 0.999 0.05 图2. 甜蜜素的标准曲线图 采用白酒基质作为加标样品，平行8个样品测试方法的回收率和方法重现性，详细结果请见表3。从表3可以看到，在加标浓度为0.1 mg/kg下，平均回收率≥ 99.42%，方法重现性≤ 2.29%，最低定量限为0.05 mg/kg，完全符合残留检测要求。 表3. 白酒基质加标的回收率和方法重现性数据（n=8） 化合物 白酒基质加标（加标浓度点：0.1 mg/kg） 回收率/% 重现性/RSD% 甜蜜素 99.42 2.29 结论 本方法采用专有的检测器，无需切换高电压即可正负离子扫描，获得优异的实验数据，完全满足对GB 5009.97-2016 食品中甜蜜素的测定，适用于甜蜜素及其类似物的日常检测。此方法准确、快速、方便。 6. 参考文献 [1] GB 5009.97- 2016 食品安全国家标准食品中环己基氨基磺酸钠的测定。