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大鼠湿热型溃疡性结肠炎采用中药治疗的疗效观察
目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:大鼠湿热型溃疡性结肠炎采用中药治疗的疗效观察 1
1、材料与方法 2
2、结果 4
3、讨论 5
文2:芍药汤对胃肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜 7
1 材料与方法 7
2 结果 9
3 讨论 10
参考文摘引言: 13
原创性声明(模板) 14
文章致谢(模板) 15
正文
大鼠湿热型溃疡性结肠炎采用中药治疗的疗效观察
文1:大鼠湿热型溃疡性结肠炎采用中药治疗的疗效观察
溃疡性结肠炎是一种主要累及结直肠的慢性非特异性炎症性疾病,其病因及发病机制尚不完全明确,主要临床表现为腹痛、腹泻、黏液便和血便[1]。在中医中属于“久痢”范畴[2]。因其病因尚不明确,缺乏有效的治疗方法,目前临床上的主要治疗药物包括氨基水杨酸制剂、激素、免疫抑制剂等,治疗周期长且极易复发,严重影响患者的生活质量,被WHO确定为现代难治病[3]。本课题组以改良2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液灌肠法联合环境饮食复合法制备的湿热证UC大鼠模型为研究对象[4],研究中药化湿疏郁方对大鼠湿热证型UC的治疗效果,以期为临床治疗UC提供新的思路。
1、材料与方法
材料
实验动物为SPF级雄性wistar大鼠,6~8周龄,体重250~280g(中国医学科学院医学实验动物研究所提供)
主要仪器与试剂
人工气候箱(广东省医疗器械厂)、麻醉机(北京益仁恒业科技有限公司)、大鼠灌胃针(北京健力园医疗器械有限公司)、无水乙醇(北京化学试剂公司),TNBS、液体石蜡及1mL注射液由南开医院消化科提供。
方法
80只雄性wistar大鼠,恒温(25℃左右)饲养,光照和黑暗各12h交替,自由进食标准颗粒饲料及饮水,适应环境7d,随机分为4个组,每组20只,即A组(对照组)、B组(模型组)、C组(西药组)、D组(中药组)
采用改良TNBS/乙醇溶液灌肠法联合环境饮食复合法。自然环境,A组正常饲养,B、C、D组高糖高脂饲料喂养10d,第11天将大鼠置于人工气候箱(温度35℃,相对湿度85%),每天持续8h,连续3d后,第14天采用改良TNBS/乙醇溶液灌肠法制备大鼠湿热型UC模型。
中西药剂量根据《新药研究与方法》。化湿疏郁法药物组成为:白头翁30g、黄柏10g、黄连8g、秦皮12g、炒白芍30g、炙甘草30g、生地榆15g、煨木香10g、肉桂6g、乌梅15g、郁金18g、柴胡15g、香附10g。
中药炮制方法:委托我院中药制作研究基地以层析法分别提取单药有效成分,加工浓缩均制成5mL糊剂,并对pH值、浓度、卫生学等进行检测。实验大鼠西药给药剂量:美沙拉嗪84mg/d,混合研碎配成5mL溶液,配好的中西药均置于4℃冰箱保存,使用前摇匀。给药方法:C组:灌食西药/次,2次/d;D组:灌食中药/次,2次/d。
A组正常饲养,不做任何处理。B组造模成功后第2天予生理盐水灌胃,/次,2次/d;C组术后第2天起予西药美沙拉嗪灌胃治疗;D组术后第2天起予中药化湿疏郁方灌胃治疗,给药疗程为7d。
化湿疏郁法对大鼠UC治疗疗效评价包括:症状学、结肠黏膜及病理组织学。症状学:包括精神、活动、饮食、毛发光泽度、大便性状等,同时按疾病活动指数(DAI)标准统计分析。总分之和,≤2分为症状缓解;3~5分为轻度活动;6~10分为中度活动;11~12分为重度活动。见表1。
表1DAI评分表
黏膜形态学:标准参照大体形态损伤指数进行黏膜评分(表2)。动物禁食不禁水24h后称重,麻醉、仰卧固定,采血后处死动物,打开腹腔,游离大肠,沿肠系膜对侧剪开,生理盐水灌洗,开水烫过的毛笔刷去肠腔内容物,并将结肠平铺于超薄泡沫上,大头针固定后,肉眼观察并评分。
表2结肠黏膜肉眼观察评分标准
病理组织学:参照Gaudio结肠病理评分标准(表3)。取其远端结肠(距肛门)约×,10%甲醛固定,常规石蜡包埋,病理切片(苏木精-伊红染色),显微镜下观察黏膜病理变化。每个组织块选取3张染色切片,每张切片随机选取3个视野,用OlymPusBX60显微镜观察。
统计学方法
数据采用x±s表示。采用统计软件处理数据,其中组内计量资料采用T检验或单因素方差分析。以P为差异有统计学意义。
2、结果
各实验组大鼠的一般状态
A组大鼠被毛紧密贴身,色白光泽,两眼有神,活动敏捷,食量较多,大便呈颗粒状;B、C、D组大鼠造模后均有不同程度的行动迟缓、精神减弱、对外界刺激淡漠、被毛松散、毛色光泽减弱、饮水量及食量下降,便血,体重下降等。A、B、C、D组的DAI评分分别为:0、±、±、±。B组DAI评分与A组相比显著增高(P)。经治疗7d后,与B组相比,C组、D组上
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