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探讨土壤酶活性及微生物功能多样性在铀污染影响下的反响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：探讨土壤酶活性及微生物功能多样性在铀污染影响下的反响 1 1、材料与方法 2 2、结果与分析 5 3、讨论 8 4、结论 10 文2：从日语中厕所称谓多样性及其原因之探讨 11 一、从日语中“厕所”的称谓 11 二、其原因之探讨 13 参考文摘引言： 16 原创性声明（模板） 17 文章致谢（模板） 17 正文 探讨土壤酶活性及微生物功能多样性在铀污染影响下的反响 文1：探讨土壤酶活性及微生物功能多样性在铀污染影响下的反响 随着核技术的快速发展，铀矿的开采与冶炼活动所产生的废石和尾砂中含有放射性物质和重金属，在雨水或山洪的冲刷及风化作用下很容易转移扩大，给人类健康和生态环境造成不利影响[1]。近年来，有关铀的研究大都集中在铀污染土壤的植物修复，并取得了显著成果，主要集中于富集植物的筛选[2，3]，而对土壤生态环境的监测、评价方法方面的研究较少。 酶是土壤的重要组成部分，也是土壤生态系统的核心之一[4]，直接参与土壤系统中的多种重要代谢过程。研究表明，土壤酶活性与重金属污染程度存在一定的相关性。因此，土壤酶活性可作为判别重金属污染程度的指标之一[5，6，7]。土壤微生物是土壤生态系统的重要组成部分，在土壤养分转化、能量循环过程中发挥着重要作用[8]。土壤微生物对重金属污染的响应较同一环境中的动、植物更敏感，能及时准确预测土壤养分及环境质量的变化，反映土壤的污染状况，是评价土壤环境质量最有潜力的指标[9，10]。但目前相关研究多集中在铅、铜、锌、镉[11，12，13]等重金属对土壤酶活性及微生物的影响，对铀污染的研究较少。 因此，本研究采用室内模拟试验，考察与土壤碳、氮、磷、硫循环相关的关键酶(土壤纤维素酶、亚硝酸还原酶、碱性磷酸酶、芳基硫酸酯酶)活性对铀污染的响应，探讨铀对不同土壤功能酶活性的作用，并采用Biolog-ECO生态板[14]考察不同浓度铀污染后土壤微生物群落功能的差异及对碳源特异利用的情况，以期为评价土壤铀污染状况和土壤修复提供理论依据。 1、材料与方法 试验材料 供试土壤为暗棕壤，采自西南科技大学校园，其基本理化性质:pH值、含水量%、有机质·kg-1、全氮·kg-1、全磷·kg-1、全钾·kg-1、有效磷·kg-1、铀浓度·kg-1。 试验设计 土样采样:在1m2内采用5点法采样，采样时先铲去地表植物，刮掉5mm厚的表层土壤，挖成直径为20cm的土坑，取样深度为6～10cm。土壤采集后过40目筛，去除杂质，备用。 铀浓度设置:选用醋酸双氧铀[UO2(CH3COO2)2·2H2O，分析纯，湖北楚胜威化工有限公司]，以纯铀计，配制成1g·L-1铀溶液并以其为母液，备用。 试验设置:采用培养皿培养样品，每个培养皿中25g土样。将外源铀浓度分别设为10、20、50、100、150mg·kg-1(干土)，以原始土壤作为空白对照。25℃下培养，土壤含水量保持在田间持水量的60%，每个处理设3个重复。分别在处理后第7、第15、第30、第60天测定土壤酶活性，在处理后第60天采用Biolog-ECO板考察土壤微生物功能多样性。 测定指标与方法 碱性磷酸酶活性采用磷酸苯二钠比色法测定[15]，其活性用24h后1g干土中释放出酚的毫克数表示。亚硝酸还原酶活性采用比色法测定[16]，其活性用1g干土24h后剩余NO2--N毫克数表示。芳基硫酸酯酶活性采用比色法测定[17]，其活性用1g干土1h生成对硝基苯酚(C6H5NO3)微克数表示。纤维素酶活性采用硝基水杨酸比色法测定[15]，其活性用1g干土1h生成葡萄糖微克数表示。每个处理重复测定3次，设无底物、无土壤处理作为空白对照。 选取铀处理60d后土壤进行Biolog-ECO板接种与培养。称取10g土壤样品，加入装有%无菌生理盐水的三角瓶中，在摇床上以200r·min-1振荡30min，即成土壤菌悬原液。将该原液连续2次10倍稀释，最终稀释比例为1∶1000。取稀释好的溶液置于无菌Ⅴ型槽，接种于ECO板的96孔中，每孔150μL，每个浓度重复3次。将接种好的ECO板放到铺有6层纱布的白瓷盘中，为防止ECO板孔中菌悬液的挥发，纱布需保持一定湿度。将ECO板置于30℃培养箱培养，分别于培养0、24、48、72、96、120、144、168h时，用GenⅢMicroStation自动快速微生物鉴定仪(美国Biolog公司)在590nm和750nm波长处读取吸光度值。 微生物代谢活性用590nm波长处的吸光度值减去750nm波长处的吸光度值表示，其中数值小于的按0处理[18]。微生物代谢强度用