凋亡细胞的诱导及检测.pptVIP

第三十张，课件共三十四张，编辑于2022年5月 本实验中培养细胞内琥珀酸脱氢酶，使MTT还原成紫蓝色甲臜，二甲基亚砜可将甲臜溶解，酶联仪测其光密度得到OD值。通过OD值可计算不同条件下细胞的存活比率。此法常用来测试细胞毒作用、癌细胞对体外放射及化学药物的敏感性、或体外细胞系筛选有效化疗药物及放射增敏剂等。 第三十一张，课件共三十四张，编辑于2022年5月 方 法 设空白组、正常对照组、加药实验组（空白组除不加细胞外、正常对照组除不加药物外其余均与加药实验组同样处理） （1）细胞传代∶将贴壁生长的肝癌细胞用0.25%胰酶消化终止后，调整细胞密度为5×104个/ml,每孔100μl传于96孔板A、B、C、D四个排孔内，待细胞培养至指数生长期时加药。 （2）每孔加入不同剂量的大蒜素（3、10、25 ml），每种剂量加三孔，以药物溶剂作对照，将培养板放回37℃继续培养0.5h； 第三十二张，课件共三十四张，编辑于2022年5月 3ul 10ul 25ul 第1组 2 3 4 大蒜素 剂量 对照组 第三十三张，课件共三十四张，编辑于2022年5月 方 法 （3）把各孔中培养基弃去，加入DMEM培养基100μl，于各孔加入10ml 5mg/ml MTT， 37℃培养4h；