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- 2022-06-08 发布于江苏
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病原微生物检测操作规程
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中,并按污染性废弃物处理。
八、培养皿、试管和试剂瓶
由于没有明确的事故发生及明显的溢出物,因此不能确定打开的平板、试管及试剂瓶里的一些微生物体是否会引起实验室感染。然而,这些很高的传染因子中很有可能有一些传染病会发生。当打开存在真菌类的平板、试管及瓶子时需格外小心,因为在操作中可能会释放出大量孢子。一些培养物应该在生物安全柜内进行操作。在吸取液体培养物前,为确保它成为均一的悬液,应给予振动混匀。剧烈的摇动将产生大量的气溶胶。轻微的打旋可以成为均一的悬液,但仍伴有微量的气溶胶产生。当液体培养物恢复原状停留片刻后再打开容器时,气溶胶产生减少。将消毒后热的金属接种环或针插入液体或斜面培养物会产生飞溅并产生气溶胶。为减少气溶胶的产生,金属接种环应在空气中冷却,或在容器内壁,或在繁殖物培养的琼脂表面没有物体生长的地方接触一下进行冷却。用特定设计的电或气体烧灼装置消毒的接种环或针,比用开口火焰加热的更可取。这种小型的烧灼装置有一个筒,可以包容从接种环或针上飞溅出的任何物质。通常可任意使用的接种环是有用的。加热使用过后为了能够立即消毒,丢弃首先放入消毒剂的容器中。
在粗糙不平整的培养基上用接种环或针划线接种培养物会导致气溶胶的产生。如果培养基表面光滑整洁,通常是不会产生气溶胶的。丢弃粗糙不平整的培养基是好的安全技术。
有盖培养皿内的培养物脱出的水里通常存在活的细小微生物,并且在倒转平板的盖子和边缘之间形成一层膜。当打开平板时这层膜破裂,释放出气溶胶。对于盖子与边缘只有三个接触点的塑料有盖培养皿可能减少危害物。使用完全干燥的平板也能减少这种风险,但是从厌氧罐内取出的孵育平板(进行厌氧孵育)很容易变湿。在盖子内装上过滤膜虽能减少危害物的产生,但不能防止扩散。如果平板明显潮湿,则应在生物安全柜内打开。
打开有螺旋帽的瓶子和带塞的试管时会产生看不见的气溶胶。这是因为在打开塞子或盖时,感染性液体在塞子边缘处形成的那层膜被破坏,产生了气溶胶。振动或离心后立即取下长颈瓶、瓶子、离心管的棉花塞子或塞盖,产生气溶胶导致环境污染。长颈瓶或离心管不处于垂直状态,去除湿的瓶塞也会产生危害。此外,离心时会产生微量的泡沫,瓶塞很可能会被少许弄湿。由于这些可能性,因此应在生物安全柜内打开液体感染性培养物及危害物质,同时穿戴手套、长袖实验室工作服,这是很好的安全措施。干缩的、有感染性的培养物可聚集在盖子边缘或培养管/长颈瓶的壁上,当受到干扰时会扩散到空气里。装有干粉状危害物的容器应在生物安全柜内打开。
九、安瓿
打开装有冻干或液体培养物的密封安瓿会产生气溶胶。为防止或减少气溶胶的产生,应在生物安全柜内打开安瓿。在复苏安瓿内容物时,要小心仔细以防割破手套和手,防止碎玻璃嘣入眼、脸及实验环境里。此外,生物产品本身不能因外界生物体或消毒剂而受到污染。应戴手套在生物安全柜内进行操作。用砂轮在安瓿的颈部划痕,消毒的湿酒精棉球包裹住安瓿,在安瓿的颈部用力折断,确保安瓿处于垂直状态。另一种方法,在安瓿的颈部做一标记,用热的金属环或棒接触使之产生裂缝,然后用消毒的湿酒精棉球包裹住安瓿,折断颈部打开。将棉球和安瓿顶端丢进消毒剂中。缓慢加入液体使安瓿内的内容物复苏,避免干燥浓缩状的内容物呈烟雾状扩散。混匀但无气泡产生,取出内容物放入干净容器内。一些实验人员想使用已有划痕的安瓿便于开口。但是,这样很可能使安瓿变得不坚固,在操作或贮存期间发生破裂。装有液体培养物的安瓿用同样的方法打开。为确保装有有害的、可流动的培养物及有活性的、粉状物质的玻璃器皿便于运输、孵育、贮存,应使用不易破碎的、防漏的外层容器应,体积足够的大以防玻璃容器渗漏或破损时可容纳所有的液体和粉末。外层容器必需贴上生物危害标识,包括感染性物质的名称。
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