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- 2022-06-09 发布于广东
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③开环DNA:? 在质粒DNA复制过程中,拓扑异构酶I会在DNA双螺旋中的一条链中引入一个切口,解开质粒的超螺旋。在质粒分离过程中由于物理剪切和酶的切割作用同样也会在超螺旋质粒中引入切口从而产生松散的开环结构。这种形式的质粒迁移速率最慢,其“松散”的分子形式阻碍了它在琼脂糖凝胶中的运动。 第三十张,课件共四十二张,编辑于2022年5月 人类基因组提取 第一张,课件共四十二张,编辑于2022年5月 人类基因组DNA的提取 第二张,课件共四十二张,编辑于2022年5月 提取方法: 1·从全血中提取 2·从口腔上皮脱落细胞,发根细胞中提取 第三张,课件共四十二张,编辑于2022年5月 (全血)原理: 细胞裂解液 :裂解细胞膜,收集细胞核 SDS:破裂核膜 蛋白酶K:使核蛋白降解成小片段并从DNA上解离 下来 苯酚﹑氯仿:抽提去除蛋白质 无水乙醇:沉淀DNA 75%乙醇:洗涤DNA沉淀 真空干燥后,溶解于TE中即得到高分量的DNA 第四张,课件共四十二张,编辑于2022年5月 (全血)操作方法: 细胞裂解与RNase/蛋白酶K 消化 1. 取100 μl抗凝全血置于1.5ml Eppendorf离心管中,再加入100 μl裂解液和20 μl RNaseA/蛋白酶K液,用移液器来回吹打混匀,室于55℃温浴35分钟,其间来回颠倒离心管几次,直至溶液呈水溶状。
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