基因工程基本操作技术.pptVIP

一、核酸提取的基本原理 1、提取的含义: 提取是指在一定的条件下用一定的溶剂处理样品，使欲分离的物质充分释放到溶剂中的过程,又称为抽提。常用的溶剂有水、稀盐、稀酸、稀碱或甘油等较缓和的试剂。 2、影响提取的主要因素: (1)提取物质的结构与性质(与其溶解度有关)如:极性物质易溶于极性溶剂，非极性物质易溶于非极性溶剂，酸性物质易溶于碱性溶剂，碱性物质易溶于酸性溶剂，两性电解质在pI时，溶解度最少。 (2)温度:一般温度升高溶解度增大 (3)溶液的粘度； (4)扩散速度； (5)扩散面积。 第三十张，课件共七十九张，编辑于2022年5月 二、核酸提取的原理 在生物体内核酸多以核蛋白的形式存在于组织中，根据核糖核蛋白(RNP)和脱氧核糖核蛋白(DNP)在不同浓度电解质溶液中溶解度明显差别进行分离。故用0.14mol/L NaCl溶解提取核糖核蛋白。 核蛋白 0.14mol/L NaCl 1.0mol/L NaCl RNP 溶解度大 溶解度小 DNP 溶解度小 （仅为水中1%） 溶解度大 (比在水中大2倍) 第三十一张，课件共七十九张，编辑于2022年5月 1. 核酸制备的一般原则 (1)分离纯化核酸总的原则： ①应保证核酸一级结构的完整性 ②排除其它分子的污染。 第三十二张，课件共七十九张，编辑于2022年5月 (2)核酸纯化