- 25
- 0
- 约1.23千字
- 约 37页
- 2022-06-26 发布于江西
- 举报
第七章 基因工程菌的发酵 ;第一节 基因工程发酵概述
第二节 基因工程生化产品的分离纯化;【学习目标】;第一节 基因工程发酵概述一、基因工程菌的培养方式二、基因工程菌的发酵设备三、基因工程菌的发酵工艺;基因工程(Genetic Engineering):;基因工程基本过程;一、基因工程菌的培养方式;1.分批培养;2.补料分批培养;3.连续培养;连续培养如用于发酵工业中.就称为连续发酵(continuous fermentation)。连续发酵与分批发酵相比有许多优点:
①自控性,便于利用各种仪表进行自动控制;
②高效,它使装料、灭菌、出料、清洗发酵罐等工艺简化了,缩短了生产时间和提高了设备的利用效率;
③产品质量较稳定;
④节约了大量动力、人力、水和蒸汽,使水、汽、电的负荷减少。
但也存在不足之处:
①主要是菌种易于退化,使微生物长期处于高速繁殖的条件下,即使自发突变率很低,也难以避免
变异的发生;
②容易污染,在连续发酵中,要保持各种设备无渗漏,通气系统不出现任何故障,是极其困难的。因此,“连续”是有时间限制的,一般可达数月至一年、两年;
③连续培养中,营养物的利用率低于分批培养。;4.透析培养;5.固定化培养;二、基因工程菌的发酵设备;1.发酵罐结构;2.发酵罐中的反应和参数;3.发酵罐控制系统;三、基因工程菌的发酵工艺;基因工程菌的基本流程;1.基因工程菌发酵培养基组成;(2)氮源;(3)无机盐;4.生长因子;(5)选择剂、诱导物;第二节 基因工程生化产品的分离纯化;建立分离纯化的依据
1.含目的产物的起始物料的特点
2.物料中杂质的种类和性质
3.目的产物的特性
4.产品的质量要求;一、细胞破碎;细胞破碎方法(按是否使用外加作用力);二、去除杂质;2.去除热原质
热原质(pyrogen)即菌体中细胞壁的脂多糖,大多是革兰氏阴性菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应,故名热原质。
相对分子质量小的多肽或蛋白质中的热原质可用超滤或反渗透的方法去除,但对大分子蛋白质无效。
脂多糖是阴离子物质,可用阴离子交换色谱去除。
脂多糖中脂质是疏水性的,可用疏水色谱法去除。
用亲和色谱法去除,配基有多粘菌素B、变形细胞溶解物或广谱的抗体。 ;3.去除病毒
成品中必须检查是否含病毒,因为病人的免疫能力低,易受病毒感染。
病毒的最大来源是由宿主细胞带入。
色谱分离一般能将病毒去除。
必要时,可用紫外线照射使病毒失活,或用过滤法将病毒去除。 ;三、产物的分离纯化;基因工程产品制备过程中常用的分离纯化方法;四、分离纯化方法的选择; 通常根据产物分子的物理、化学参数和生物学特性进行蛋白质纯化方法设计。;思考题;The End
原创力文档

文档评论(0)