- 1、本文档共13页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
.
二 基因表达载体的构建
思考与讨论:
1 基因载体必须具备的基本条件是什么?
2 基因工程可做载体的结构有那些?最常 使 用 的载体是什么?
3 请图示大肠杆菌质粒结构。
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
4 从苏云金芽孢杆菌细胞DNA分子中提取得到
Bt毒蛋白基因能否直接进入普通棉细胞中?
如果把目的基因人工注射到普通棉细胞中,
那么该基因在棉细胞中会稳定存在,复制和表
达吗?
5 假如你是一个基因工程操作者,若使目的基因
进入棉细胞,并能在棉细胞中遗传和表达,你
应当采取什么办法?你能说出其中的理由吗 ?
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
(一 )基因表达载体的构建
2 请你定义:基因表达载体构建之含义?
1 基因工程操作中,构建基因表达载体之目的
是什么?
将目的基因、启动子和终止子科学按装
在经修饰和改造完备的载体之上。
确保目的基因在受体细胞中稳定存在、复制、遗传和表达,使其发挥作用。
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
3 基因表达载体之基本组成是什么?
(1)结构基因——即提取的目的基因核苷酸序列,负责
编码目标蛋白质。
(2)启动子——位于编码蛋白质结构基因之首一段殊结
构的DNA片段,RNA聚合酶的识别部位和结合部位。
(3)终止子——位于编码蛋白质结构基因末端一段特殊
结构的DNA片段,具有终止基因转录过程的作用。
(4)复制原点——能够自我复制保证目的基因在受体细
胞中复制遗传和表达。
(5)遗传标记基因——检测受体细胞中是否含有目的基
因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
请你以质粒作载体构建基因表达载体之模式图
基因表达载体
基因表达载体
启动子
复制原点
终止子
插入目的基因
遗传标记基因
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
4 建构基因表达载体方法
(2)用同种限制酶切割目标DNA分子,截取目
的基因,使其产生与质粒相同的末端。
(1)用某种限制酶如EcoRI限制酶,在基因插
入位点切割质粒,使质粒出现一个切口,
露出两个黏性末端。
(3)依据目的基因表达的特点和位置,用限制
酶切割受体细胞相应的控制元件 ——启动
子和终止子。
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
(4)用限制酶将启动子和终止子与目的基因连
接起来,成为一个整体。
(5)将目的 基因 插入质 粒切口处,用 E•coli
DNA连接酶把基因与质粒缝合起来,成功
创建一个重组DNA分子。
建议模拟完成建构大肠杆菌基因表达载体
,并写出具体步骤。
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
三 将目的基因导入受体细胞
基因导入受体细胞的标志是什么?
1目的基因与载体在受体细胞共同复制、遗
传和表达。或目的基因插入细胞染色体上DNA分
子之中,随同受体细胞DNA分子复制、遗传和表
达。
2 实际上外源目的基因变成了受体细胞的一部
分,这种现象叫做转化。
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
2 目的基因导入受体细胞遵循的基本原理是什么?
通常借鉴细菌或病毒侵染细胞和寄生之途径。
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
(一)将目的基因导入植物细胞
农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,在
自然条件下易感染双子叶植物和裸子植物,而
对大多数单子叶植物没有感染力 。
2 感染原理:
当植物体受到损伤时,伤口处细胞分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,这时农杆菌中的Ti质粒上的T—DNA分子可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色DNA分子之上。
1 农杆菌转化法
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
目标
名师归纳综合总结@欢迎下载#可编辑!!!!!
.
(二) 将目的基因导入动物细胞
2 实例
基因工程培育转基因动物最常用、最有效的
方法——显微注射技术
(1)将含有目的基因的表达载体提纯;
(2)从雌性动物体内取出受精卵细胞。
(3)用显微注射仪把目的基因注射到受精卵细胞;
(4)把含有目的基因的受精卵移植到雌性动物子
宫或输卵管发育成具备新性状的动物。
世界上第一例体型比普通小鼠大1.8 倍的转基因“超级小鼠”就是
您可能关注的文档
- 宏观经济政策分析ppt课件.pptx
- 护工培训最新版本.pptx
- 护理安全管理教学最新版本.pptx
- 护理安全警示教育最新版本.pptx
- 护理安全评估与安全警示教育.pptx
- 护理病例讨论模板.pptx
- 护理病情观察.pptx
- 护理不良事件.pptx
- 护理不良事件安全警示教育.pptx
- 护理不良事件案例分析.pptx
- 2024年广东惠州博罗县巩固脱贫公益性岗位招聘6人历年【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东惠州市龙门县事业单位招聘工作人员20人历年【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东惠州惠城区桥东街道办事处招聘治安队员8人历年【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东江门开平市人大常委会办公室招聘编外工作人员2人历年【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东河源市委组织部招聘编外人员2人历年【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东深圳事业单位行测讲座历年【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东深圳市大鹏新区事业单位招聘34人历年【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东汕尾市事业单位招聘急需人才拟聘(市直第二批)【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东汕尾海丰县委员会招聘政府聘员1人【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 2024年广东文化厅直属文化馆招考工作人员【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
文档评论(0)