食品生物化学实验教案 .docxVIP

本文格式为Word版，下载可任意编辑 — PAGE \* Arabic 1 — 食品生物化学实验教案 食品生物化学测验指导   高建华 曹劲松 宁正祥 编   华南理工大学 二O O六 年 三 月  目 录  第一片面 普遍试验  测验一 果胶的制备和特性测定 一、从果皮中提取果胶 二、果酱的制备 测验二 卵磷脂提取、鉴定及乳化特性试验 测验三 蛋白质的盐析透析 一、蛋白质的盐析 二、蛋白质的透析  测验四 氨基酸纸电泳分开鉴定 测验五 激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响 一、激活剂、抑制剂对唾液淀粉酶活力的影响 二、温度和pH值对а-液化淀粉酶活力的影响 测验六 果蔬中过氧化物酶活力测定 测验七 酶催化转氨基回响的纸层析鉴定  1   1 1 1 2 6  7 9 10 12 5 5 10 14  测验八 焦糖的制备极其性质 17 测验九 酶促褐变的抑制及叶绿素的性质 19   其次片面 综合设计性测验：一、酵母蔗糖酶的分开纯化  测验一 活性干酵母蔗糖酶的提取 23 测验二 蔗糖酶的分级沉淀提取 25 测验三 蔗糖酶的葡聚糖凝胶层析法脱盐 测验四 离子交换柱层析分开纯化蔗糖酶 测验五 蔗糖酶的交联葡聚糖凝胶色谱分开纯化 测验六 聚丙烯酰胺凝胶电泳分开测定蔗糖酶纯度 测验七 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 测验八 蔗糖酶的酶活特性研究   辅佐性测验  测验一 蔗糖酶活力测定 测验二 Folin-酚法测定蛋白质含量 测验三 考马斯亮蓝染料比色法测定蛋白质含量 测验四 紫外吸收法测定蛋白质浓度  附表： 调整硫酸铵溶液饱和度计算表  附表1 0℃下由S1提高到S2时每100mL样品加固体硫酸铵的克数 附表2 室温下由S1提高到S2时每升加固体硫酸铵的克数 二、自然活性物质植物黄酮的提取及应用  测验一 藤茶植物黄酮的提取 测验二 重结晶法纯化黄酮提取物  2  38 43 45  48 50 51   53 54   55 56  28 30 35 46 测验三 植物黄酮重结晶晶体形态查看 58 测验四 紫外分光光度法测定总黄酮含量 60 测验五 高效液相色谱法测定蛇葡萄属植物黄酮的含量 62 测验六 植物黄酮稳定性试验 66 测验七 植物黄酮在油脂中的抗氧化活性测定 67 辅佐性测验：   测验一 油脂过氧化物值的测定 测验二 油脂酸价的测定  70 72  测验一 果胶的制备和特性测定  一、果胶的制备  （一） 目的要求 了解果胶的根本布局、果胶的分类及提取原理和方法。 （二） 测验原理  果胶物质可分为三类，原果胶、果胶及果胶酸，其根本布局是不同程度甲酯化和被 钠、钾离子中和的α-半乳糖醛酸以1,4-苷键形成的聚合物，分子量高达200000左右。 原果胶不溶于水，主要存在于出世细胞壁中，在确定温度经稀酸长时加热条件下，果皮 层细胞壁的原果胶发生水解，由于布局甲酯化程度降低及片面苷键断裂而转变成水溶性 果胶。  水溶性果胶经脱水干制有利于保藏和运输，果胶干制有直接枯燥法和沉淀脱水两种方 法。直接枯燥通常是把浓缩的果胶水溶液通过喷雾枯燥获得。沉淀脱水那么是根据果胶不溶 于高浓度乙醇特性，采用乙醇沉淀提取。乙醇沉淀提取果胶，操纵酒精浓度极为关键，浓 度太高或太低都是不利的，浓度过高等于水分裁减，水溶性的非胶物质没有机遇溶解在水 中，会随果胶一起沉淀出来，使果胶纯度降低；反之假设乙醇浓度太低，水分含量过高， 果胶沉淀不完全，因此用乙醇沉淀提取果胶，乙醇用量最好为55%—60%左右。果胶溶液 中存在有微量电解质时，参与乙醇果胶将以海绵絮状沉淀析出，反之不易聚集析出。 柑橘类果皮是提取果胶的优良原料，崭新果皮含果胶约1.5%—3%，干果皮那么含9%-18%，柠檬皮果胶含量更多，崭新果皮内含2.5%—5.5%，干果皮内含量高达30%—40%。  （三）试剂及材料  1、0.5%HCl溶液 量取12mL浓盐酸，加水稀释至1000mL。  2、1mol/LNaOH溶液 称取40gNaOH，用水溶解并稀释至1000mL。 3、95%乙醇。