BRAF基因突变检测在甲状腺乳头状病变中的临床意义（临床医学论文资料）.doc

BRAF基因突变检测在甲状腺乳头状病变中的临床意义（临床医学论文资料） 文档信息 ： 文档作为关于“医学心理学”中“肿瘤学”的参考范文，为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文4952字，doc格式，可编辑。质优实惠，欢迎下载！ 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：BRAF基因突变检测在甲状腺乳头状病变中的临床意义 1 1 资料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 4 文2：乳腺乳头状病变基础分析 6 参考文摘引言： 7 原创性声明（模板） 8 文章致谢（模板） 9 正文 BRAF基因突变检测在甲状腺乳头状病变中的临床意义（临床医学论文资料） 文1：BRAF基因突变检测在甲状腺乳头状病变中的临床意义 [作者简介] 张翼（1979-），男，江苏如皋人，硕士研究生，主治医师，研究方向:肿瘤临床和基础研究。 [通讯作者] 张士虎 （1975-），男，江苏滨海人，博士在读，副主任医师，研究方向:肝、胆、胰、胃肠肿瘤外科。 甲状腺癌是最常见的内分泌肿瘤，主要包括乳头状癌、滤泡状癌、髓样癌和未分化癌，其中甲状腺乳头状癌最常见，约占85％～90％，以女性多发[1]。由于多种因素，导致甲状腺肿瘤的发病率呈现逐年上升趋势。良性甲状腺病变中常出现乳头状病变，当乳头出现不典型增生时易误诊为癌，从而扩大手术范围，给病人造成不必要的伤害，因此对其性质鉴别具有重要临床意义。而肉眼及显微镜下的观察诊断具有一定的主观性，这就需要一个客观的临床检测指标帮助辨别良恶性。目前多项研究[2，3]指出甲状腺乳头状癌和brAF V600E突变密切相关，此突变在甲状腺其他良恶性肿瘤中突变率非常低，具有一定特异性，而brAF V600E在甲状腺不典型乳头状腺瘤中的突变情况尚无人报道。为探讨brAF基因在甲状腺乳头状病变中的突变情况及临床意义，该研究选取2009年11月—2013年3月以来到该院就诊的56例甲状腺乳头状病变的患者，采用直接测序法分析了甲状腺乳头状癌和甲状腺不典型乳头状腺瘤的brAF基因突变情况，探讨其在鉴别诊断中的价值，现报道如下。 1 资料与方法 一般资料 收集2009年11月—2013年3月江苏省中医院病理科54例甲状腺乳头状病变石蜡标本，男16例，女38例;平均年龄44 19～70岁。其中甲状腺乳头状癌24例（包括微乳头癌6例）， 甲状腺不典型乳头状腺瘤30例。所有组织标本均经病理证实，诊断参考2004年WHO诊断标准[4]。甲状腺乳头状癌患者行单侧及峡部全切加颈部淋巴结清扫， 甲状腺微小乳头状癌患者行单侧及峡部全切加中央区淋巴结清扫，不典型腺瘤行甲状腺次全切除术，所有患者目前均存活。 研究方法 基因组DNA提取 切取5张10 um厚石蜡白片，脱蜡消化后提取DNA。具体方法见试剂盒说明书（Omega FFPE DNA Kit，USA）。以凝胶电泳系统检测DNA模板的质量。 PCR扩增 使用ABI -2700型测序级扩增仪，扩增目的基因片段。反应体系：10×PCR Buffer 2 μL，HotStar Taq DNA Polymerase μL(Q IAGEN，USA)，5×Q-Solution 4 μL， dNTP 2 μL，Primer各1 μL，模板DNA 1 μL，去离子水8. 75 μL。95 ℃ 10 min; 94 ℃ 50 s， 57 ℃ 1 min， 72 ℃ 1 min，共循环35次，最后于72 ℃延伸10 min。PCR产物纯化具体方法见试剂盒说明书（AXYPrep PCR Cleanup Kit， USA） 测序 测序方法[5]：在3100-Avant遗传分析仪进行测序; Data collection软件自动进行数据处理和分析。对于测序中发现有突变的病例，都进行反向测序验证。将测序结果用DNA sequencing analysis5. 1软件分析原始测序数据，获取测序电泳图和序列。将样品序列用AB I SeqScape软件与genebank标准序列进行比对，观察样本基因序列的改变。 统计方法 数据处理使用spss 软件。计数资料采用χ2检验、Fisher’s确切概率法进行显著性检验。 2 结果 经直接测序法测定，54例样本成功检测了brAF第15外显子突变情况，突变位点全部位于V600E位点，未发现其他类型突变。24例甲状腺乳头状癌，16例发现brAF基因15外显子第600位密码子A/T杂合（V600E），突变率为%（16/24）。而30例甲状腺不典型腺瘤样本中未发现V600E位点病理性突变（0/30），两者差异有统计学意义（），与组织学类型相关。见表2。 3 讨论 甲状腺乳头状癌组织光镜下多表