丁苯酞对AD大鼠模型海马BACE及NEP活性含量的影响（职称论文资料）.docVIP

丁苯酞对AD大鼠模型海马BACE及NEP活性含量的影响（职称论文资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：丁苯酞对AD大鼠模型海马BACE及NEP活性含量的影响 1 1 材料与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 4 文2：黄芩茎叶总黄酮对AD大鼠模型海马神经元超微结构的影响及抗氧化作用 5 1 材料与方法 6 2 结 果 8 3 讨 论 8 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 丁苯酞对AD大鼠模型海马BACE及NEP活性含量的影响（职称论文资料） 文1：丁苯酞对AD大鼠模型海马BACE及NEP活性含量的影响 阿尔茨海默病为神经系统退行性疾病，是老年性痴呆的主要类型之一，其发病机制尚未阐明，但较为公认的是Aβ级联假说［1］。Aβ在颞叶、海马的沉积可引起细胞内钙稳态失衡、氧化应激、炎症免疫、细胞凋亡、线粒体损伤、胆碱能系统的损伤等，最终引起神经元的丧失，产生记忆力及认知的下降。因此，Aβ在AD的发病中起着关键性作用，而减少Aβ沉积成为治疗AD的一条重要途径。丁苯酞可以减少AD模型大鼠海马Aβ的沉积［2］，其可能机制之一是促进α分泌酶的表达［3］，但丁苯酞是否会影响Aβ代谢其他重要途径尚不清楚。β分泌酶（BACE）是Aβ产生过程中第一个限速酶，而中性内肽酶（NEP）是脑内重要的Aβ降解酶。本实验通过检测影响Aβ代谢BACE和NEP，探讨丁苯酞减少AD大鼠模型脑内Aβ沉积的可能机制。 1 材料与方法 动物与分组 健康雄性Wistar 大鼠40只（山西医科大学实验动物中心提供），体重280 g～320 g。随机分为4 组：假手术组、模型组、丁苯酞低剂量组、丁苯酞高剂量组，每组各10只，自由进食、饮水，自然昼夜节律光照。 药品、试剂与仪器 丁苯酞（恩必普，NBP）由石药集团恩必普药业有限公司提供；Aβ1-40蛋白片段（北京博奥森）；大鼠脑内β-分泌酶、中性内肽酶活性ELISA 试剂盒（美国RD）；江湾1C型脑立体定位仪；FA 2004/1104型电子天平（上海天平仪器厂）；玻璃匀浆器（天津科器集团公司）；离心机（LD5-2A，北京医用离心机厂）；电热恒温培养箱Jc303型（上海成顺仪器仪表有限公司）；Wellscan MK-3 全自动多功能酶标仪（芬兰Labsystems Dragon公司） 模型建立及给药 采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导AD模型［3］。将丁苯酞溶于植物油中，制成浓度为10 mg/mL植物油与药物混合物进行灌胃；根据人和动物按体表面积折算的等效剂量，丁苯酞高剂量组按60 mg/kg给药，丁苯酞低剂量组按30 mg/kg给药，假手术组和模型组大鼠给予等体积植物油，造模手术后第一天即给药，灌胃共4周，均每日1次灌胃。 海马组织匀浆β分泌酶及中性内肽酶的活性含量测定 灌胃满4周后处死大鼠，进行麻醉，快速断头，在冰盘上迅速将两侧海马剥离（右侧海马用以β分泌酶的检测，左侧海马用以中性内肽酶的检测），用冰冷的生理盐水冲净海马表面血迹，滤纸拭干，后以电子天平称重；按1 g∶10 mL冰水溶液中用玻璃匀浆器研磨制成匀浆，4℃ 3 500min离心10 min，取上清液，制成10%海马脑组织匀浆。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠海马组织匀浆中β分泌酶及中性内肽酶的活性含量。 统计学处理 计量资料以均数±标准差（x±s）表示。用SPSS 软件处理，采用单因素方差分析。 2 结 果 β分泌酶的活性含量（见表1） 与假手术组相比，模型组大鼠海马组织匀浆中β分泌酶的活性含量明显增加（P）；但与模型组比较，丁苯酞低剂量组、高剂量组β分泌酶的活性含量没有明显降低；低、高剂量丁苯酞组β分泌酶的活性含量差异也无统计学意义。 表1 丁苯酞对AD大鼠海马BACE活性含量的影响（x±s） 中性内肽酶活性 与假手术组大鼠相比，模型组大鼠海马组织匀浆的中性内肽酶活性明显增加（P）；与模型组比较，丁苯酞低剂量组、高剂量组大鼠海马组织匀浆的中性内肽酶的活性含量明显降低；低、高剂量丁苯酞组大鼠海马组织匀浆的中性内肽酶的活性，差异无统计学意义。详见表2。 表2 丁苯酞对AD大鼠中性内酶活性含量的影响（x±s） 3 讨 论 阿尔茨海默病的发病机制虽然尚未阐明，但Aβ在AD发病过程中的重要地位已有广泛共识。Aβ由APP水解产生，它水解途径有两条：第一条以α分泌酶、γ分泌酶水解［4］，该途径不产生β淀粉样蛋白，而产生可溶性蛋白sAPPα［5］，这也是APP加工的主要途径。第二条是APP分别由β分泌酶、γ分泌酶水解，该途径产生完整的Aβ［4，6］。β分泌酶作为Aβ生