PCR扩增和电泳检测课件.pptVIP

* 9班 实验13 DNA片段的PCR扩增 1、用PCR技术对DNA进行扩增 2、用琼脂糖凝胶电泳技术对扩增后的DNA进行检测 * . 电 泳 观察 PCR反应 实验步骤 * . DNA在体内复制的条件是什么？ 模板： 酶： 原料、能量： 解旋酶、DNA聚合酶等。 DNA分子的每条链 dATP、dGTP、dCTP、dTTP 引物： 温和的反应条件 * . DNA分子的结构 * . 合成DNA分子的原料——脱氧核苷三磷酸 * . 合成DNA分子的原料——脱氧核苷三磷酸 dATP dGTP dCTP dTTP * . 聚合反应机理： * . DNA聚合酶 * . 不同细胞的细胞周期 不同生物细胞 需要的时间 细 菌 一般是20~30分钟 蚕豆根尖细胞 17.3小时 小鼠十二指肠细胞 15.3小时 人的肝细胞 22小时 人的宫颈癌细胞 22.5小时 PCR技术可在几小时内， 将特定核酸序列扩增百万倍! * . PCR的概念 PCR （ Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应）是指在体外，通过特异DNA引物扩增核酸分子中某个特定区域的技术。 * . PCR的反应体系 DNA模板 原料： dNTP(dATP、dGTP、dCTP、TTP) ； 酶： Taq聚合酶（嗜热细菌中分离