WBC分类记数分析和总结.docx

考核项目五 WBC分类记数 【学习目的和要求】 掌握WBC分类记数的操作方法。 了解WBC分类记数的临床意义。 【器材】 采血针、显微镜、载物片、分类记数器、吸管、染色液、缓冲液、干棉球、酒精棉、碘酒、保定台或保定柱等。 一、血液检验 (一)血液的采取 血液的采取采血的部位和方法,根据检验项目、所需血量和动物种类的不同,可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。常用血检项目中除血沉测定和红细胞压积测定需较多量血液外,其他各项测定均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管法采血。 1、毛细血管采血法 常用血液检验项目中除血沉测定和红细胞压积测定需较多量的血 液外，其他各项测定用血量较少，均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管法采血。采血前，先将局部剪毛，要尽量剪短，再用酒精棉球消毒， 待酒精挥发、干燥后，用消毒的干燥针头迅速刺入消毒部位约2～3mm深， 让血液自然流出。如血液不易流出时，可在刺入部的上方稍加按压，但勿用力强挤，以免混入过多的组织液。开始流出的第1滴血，可用于制作血片；然后用干棉球擦去局部的剩余血液，利用重新流出的第2滴血液作红、白细胞计数和血红蛋白测定；若利用第3滴血液时，仍然要将第2滴血液的剩余部分擦干，使局部皮肤干燥，否则以后流出的血液易分散，不能形成滴状，不易吸取。对犬、猫等小动物耳缘采血时，可在局部剪毛、消毒后，涂布一层凡士林，然后在局部刺入，流出的血液易成滴状，便于吸取。利用毛细血管血液时，取血动作要迅速，可做多项测定，如果操作不熟练，动作缓慢往往引起血液凝固。利用毛细血管血液作多项测定时，一般应先作红细胞计数测定，后作血红蛋白或白细胞数测定。 2、静脉采血法 马、牛、羊可由颈静脉采血（具体部位和方法，见注射法部分）。猪可由前腔静脉采血（详见注射法部分）。鸡可由翼下静脉采血，即用细针头刺入翼下静脉后，任血液自行流出并将其接入试管中。犬、猫可利用小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉。局部剪毛消毒后，用止血带扎住采血部上端或由助手握住采血部位近心端，使静脉怒张，用消毒、干燥的注射器接上针头，针头斜面向上，先以约30度角穿刺静脉 前2～3mm处的皮肤，然后再穿刺静脉壁入静脉腔，待见有血液流入注射筒内后，将针头顺势向静脉腔内推入少许，以防动物骚动时针头滑出静脉。用右手食指将针头固定，左手慢慢抽血，抽血时不可过分用力，以免引起溶血。待抽至所需血量后，先放松止血带，再用消毒棉球按住伤口，拔出针头。除去注射器上的针头，将血液沿管壁缓缓注入清洁的试管内。需抗凝血液时，试管内应加抗凝剂，并立即混匀，以免凝固。 3、心脏采血法 多用于鸡及实验动物需多量血液时。鸡可由胸腔入口处向心脏刺 入，刺入心脏时，由于心腔压力较静脉高，血液可自然涌入注射器，兔及鸡等亦可在左侧胸部第1、2肋间，摸到心搏动明显处，针头与胸壁呈垂直方向缓缓刺入，针头进入心腔内时，血液可自然进入注射器。 （二）血清快速分离法 如需迅速分离血清（特别对牛），可将盛血管放入离心机内，以2,500r/min的速度离心3min，使红细胞与血浆分离，然后放入37℃温箱内30min促使血块加速凝固、收缩，可迅速分离到较多的血清。 （三）血液抗凝法 供检血最好采取后随即进行检验。若不能立即检验，为防止血液凝固，可加入抗凝剂，并应充分混合之。常用的抗凝剂有： 草酸钠是最常用的抗凝剂，为白色粉末状，每1.5～2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常规检验。但因其对红细胞大小有影响，故不能用作红细胞压积测定，如需测定红细胞压积时，可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。 双草酸盐抗凝剂：草酸钾0.8g；草酸铵1.2g；蒸馏水加至100.0ml。 溶解后，吸取0.5ml，加于供采血用的试管或小瓶中，置干燥箱内（温度不能超过80℃），烘干备用（实际含双草酸盐10mg，可供5ml全血抗凝用）。 （3）3.8％枸橼酸钠溶液主要用于血沉测定时的抗凝。 （4）乙二胺四乙酸二钠（EDTA二钠）每10mg可使5ml全血抗凝；或配成 10％溶液，每2滴可使5ml全血抗凝。 怀疑传染病时，采血过程应防止到处流散，检后的残余血液及所用器皿亦应进行消毒处理。 二、白细胞分类计数方法 以百分率表示各种类型白细胞间的数量关系 ,称为白细胞分类计数。 (一) 原理 白细胞分类计数法是将血液制成分布均匀的薄膜涂片，用复合染料染色，根据各类白细胞着色特征予以分类计数，得出相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义。 (二) 器材与试剂 载玻片、染色盆及支架、染色缸、洗瓶、显微镜及镜油、白细胞分类计数器、吸水纸等。 1、瑞（Wright）氏染液 瑞氏染粉0.lg，甲醇60.0ml。将染色粉置于研钵中，加少量甲醇研磨， 使其溶解，然后将已溶解的染液倒入洁净的棕色玻瓶，剩下未溶解的染料再加少量甲醇