培养基的组成配制与灭菌.pptxVIP

第1页/共43页？？？？？？第2页/共43页 第一节 培养基的配制第3页/共43页培养基是根据药用真菌生长发育所需要的各种营养物质，采用人工配制或直接利用天然产物作培养的基质。培养基除含有满足药用真菌所要求的碳源、氮源、无机盐类及各种必要的维生素营养成分外，有些特殊要求的应加一定量微量元素。此外，还应保证其所要求的其它生活条件，如适量的水分，适宜的酸碱度、合适的透明度、固化性等。第4页/共43页一、培养基的组成和作用 培养基（medium）是真菌培养的重要材料，是真菌生长的营养物质来源，只有配制出适宜的培养基，才能使真菌培养获得成功。 通常真菌培养所用培养基包括以下六大类成分，即碳源、氮源、有机成分、矿质营养、琼脂以及其他附加物等。 培养基的主要指标是营养成分及碳氮比。第5页/共43页一、培养基的种类（一）根据物理性状分类1、液体培养基液体培养基是根据各种药用真菌所需的营养成分，按一定的配比混合而成的营养液。液体培养基由于有利于药用真菌菌丝细胞对营养物质的接触和吸收，繁殖生长迅速。适用于药用真菌菌种生产和菌丝体生产。在实验室里，液体培养基常用于药用真菌的生理测定。第6页/共43页一、培养基的种类（一）根据物理性状分类2、半固体培养基液体培养基中添加少量琼脂（0．2％～0．5％）或一定量的玉米粉、麸皮等，使之成为半固体状态，称为半固体培养基。适用于菌种的分离、培养和保藏母种。第7页/共43页一、培养基的种类（一）根据物理性状分类3、固体培养基在液体培养基中，加人适量的凝固剂即可制成固体培养基。常用的凝固剂有琼脂、明胶、硅胶等。一般多用琼脂，琼脂的添加量根据季节不同而有所不同，冬天1．5％～2．0％，夏天2．0％～2．5％，超过2．5％，培养基易分裂，影响菌丝生长。适用于菌种的分离、培养和保藏原种用。第8页/共43页一、培养基的种类（一）根据物理性状分类3、固体培养基在药用真菌生产中，用各种富含纤维素和木质素的木屑、棉籽壳、甘蔗渣、稻草、麦杆等做为原料，加入一定量的辅助营养物质和水，便可制成木屑或棉籽壳等培养基，这些培养基也称为固体培养基。第9页/共43页一、培养基的种类（二）根据营养物质分类1、天然培养基是指用天然有机物配制而成的培养基。如小麦、大豆、玉米、麸皮、米糠、马铃薯、各种禾杆、木屑、棉籽壳、甘蔗渣等农林副产品及其下脚料，以及动植物组织的浸出液，如牛肉膏、肉汤、马铃薯汁、麦芽汁、豆芽汁等都可以用来配制天然培养基。第10页/共43页一、培养基的种类（二）根据营养物质分类1、天然培养基这种培养基含有丰富的营养物质，来源广泛、成本低，适合于菌种分离、培养、保藏及药用真菌大规模生产用。这些天然有机物化学成分比较复杂，几乎无法完全了解，即使是同一种物质，因产地、采收季节、提取方法和品种的不同，其营养组成和含量也不尽相同，不宜作为药用真菌生理研究的培养基。常用的天然培养基，如马铃薯琼脂培养基、木屑麸皮（或米糠）培养基和堆肥培养基等。第11页/共43页一、培养基的种类（二）根据营养物质分类2、半合成培养基是用成分未知的天然物质和成分已知的物质配成。如PDA培养基中的马铃薯是未知成分的天然物质，而葡萄糖是已知化学成分的物质。马铃薯的成分因品种、成熟度和施肥栽培条件不同，每次用其配成的培养基不可能是相同的。因此， 在天然培养基中添加适量的无机盐，或在合成培养基中添加某些天然有机物配制而成的培养基，都称半合成培养基。是菌种生产和药用真菌栽培中常用的培养基。 第12页/共43页一、培养基的种类（二）根据营养物质分类3、合成培养基是指采用化学成分和浓度已知的有机化合物，包括碳水化合物、含氮化合物、有机酸类，无机盐及生长素配制而成的培养基。这类培养基组成和含量明确，一般用于药用真菌的有关营养、代谢等生理生化研究，以及菌种的纯培养和菌种保藏。第13页/共43页一、培养基的种类（三）根据培养基特殊用途分类1、基础培养基——基本营养成分2、加富培养基——添加了高营养成分3、鉴别培养基——加入某种成分，以区别不同真菌4、选择性培养基——对培养对象有选择作用第14页/共43页二、培养基配方的选择（一）培养基配制的一般原则1、要含有所培养的菌类生长所必需的各种营养物质，如水分、碳源、氮源、无机盐、维生素等。且所含的养分浓度适宜，比例平衡，各种成分的浓度配比要合理。有利于培养物的吸收利用。2、具有一定的生长环境，要有适宜的pH和缓冲能力。3、必须经过严格的灭菌，使之保持无菌状态。第15页/共43页二、培养基配方的选择（一）培养基配制的一般原则4、培养料的选择在菌种制备过程中，从母种、原种至栽培种，各个阶段的目的要求有所不同，所选用的培养基的配比也应有所区别。5、营养成分的配比培养料的碳氮比（C/N）是否适宜，是衡量其质量好坏的重要指标，直接影响药用真菌的发生时