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灭菌操作规程
灭菌操作规程
灭菌操作规程
精选文档
灭菌操作规程
一、微生物检验器皿的包扎
1、目的
杀菌前的准备工作
2、所用用具
、棉花
、橡胶塞
、牛皮纸或报纸
、棉绳
3、操作方法
、试管:塞上棉塞,而后用牛皮纸或报纸把试管头包扎起来。做乳糖胆盐培育基时,将试管头塞上专用塑料塞放入铁丝框。
、吸移液管:将吸移液管一头塞上棉塞,而后单支或几个用纸包起来,或用盒装。
、三角瓶、抽滤瓶:将三角瓶(抽滤瓶)口用棉塞塞好,或塞上橡胶塞,而后用牛皮纸把塞头部包起来。
、玻璃洗瓶:将玻璃洗瓶瓶口用棉塞或橡胶塞塞好,用牛皮纸把塞头部包起来。
、磁性漏斗:用牛皮纸或报纸将磁性漏斗整个包扎起来。
、平皿:10个为一组,用牛皮纸包裹或盒装。二、高压蒸汽灭菌
1、合用范围
.
精选文档
本法合用耐湿热用具的灭菌如:
、易分解的、耐热性的培育基
、耐热性好的玻璃器皿
、橡胶
、耐热性塑料
2、原理
利用1.5kgf/cm2,121℃的饱和蒸汽,灭菌20分钟。
4、仪器和设施
高压灭菌锅
5、操作方法
、包装
装入培育基的(箱)瓶用螺旋盖盖上,容器用棉塞塞住,再用牛皮纸包扎。螺旋盖应微松。
在瓶中的培育液不要超出1L,不然灭菌不完全。
容器的上部应留有足够的空间,以便产生气泡。
用具用牛皮纸包裹,放入灭菌袋中。
用具的组合和包裹应同意灭菌蒸汽接触所用物件。
各种用具装入釜内时,互相间要留有缝隙以使蒸汽自由流动。
、高压杀菌
在灭菌器内加入适当的水(不得低于釜底指示横片,露出加热盘管),放入需灭菌物件,盖上内盖,拧紧外盖上的螺栓。拧紧时要注意对称的进行,不然简单造成漏气。
.
精选文档
开始加热前,将排气阀翻开。
待温度上涨至100oC时(即当全部的冷空气已排出时),封闭放汽阀门,使压力上涨至1.05kgf/cm2(15磅/英吋2),在此压力下保持
分钟。
注意:加热时间不要过长,但也不要低于指定的20分钟。
、断开电源。
、排气阀封闭的状态下,让釜内压力自然下降。
、翻开高压杀菌锅。注意一定使灭菌釜内无压力为宜。
、灭菌后的物件冷却至室温,拿出。
、翻开出水阀门,放尽釜内剩水。
6、注意事项
高压灭菌器上的安全阀,是保障安全使用的重要机构,不得任意调理。
三、干热灭菌
1、目的
保持在干燥状态下的玻璃器皿和金属的灭菌。
2、合用范围
本法合用以下的物件:
、干燥的玻璃器皿(吸管、平皿等)
、金属用具(镊子等)
、粉状物件
、瓷器
3、原理
.
精选文档
在160oC干热空气中灭菌2小时。
4、仪器和设施
电热干燥箱
5、操作方法
、用具用牛皮纸或灭菌袋包(装)扎,放入金属容器内。
、用具在干燥箱加热前放入,每个用具之间留有足够的缝隙,使热空气能畅达。
、封闭箱门接通电源,翻开通气孔,使箱内湿空气能逸出,至箱内温度达到100℃时封闭。
、加热至160℃,保持2小时。
、切断电源,冷却至60℃时,翻开箱门,拿出灭菌用具,并翻开箱顶通气口。
6、注意事项
、灭菌时一定注意温度不可以超出180℃,免得使棉花、报纸烘焦。
、灭菌时不得翻开箱门。
、干燥箱未冷却时,不要拿出里面用具,防范内外温差过大造成玻璃用具爆炸。
四、紫外线灭菌
1、目的
无菌室内的台面和空气的灭菌。
2、原理
紫外灯发出的紫外线波长为200—300nm之间,拥有杀菌能力。波长
.
精选文档
为265—266nm时,杀菌力最强。因为紫外线的作用光谱和核酸的汲取光谱相一致,作为遗传物质的DNA能激烈的汲取紫外线,从而引诱形成胸腺嘧啶二聚体,克制DNA的复制,达到菌体致死的目的。
3、操作方法
、开紫外灯前,能够在室内喷洒酚溶液。一方面使空气中附着有微生物的灰尘下降,另一方面能够杀死一部分细菌和芽孢。
、开紫外灯前,室内桌面、椅子等可用消毒液擦洗,以增强紫外灯的灭菌成效。
、开紫外灯照耀20—50分钟后,关掉紫外灯。
、30分钟后进无菌室进行操作。
.
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