高一理化生生物dna重组技术基本工具新人教选修.pptx

第1页/共42页基因工程的产物第2页/共42页专题1基因工程第3页/共42页一、基因工程的概念1、概念: 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取(复制)出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传特性。第4页/共42页2、场所:生物体外3、基因工程的最终目的:定向改造生物的遗传性状4、基因工程的主要目的: 定向改造生物的遗传性状，获得人类所需要的基因产物5、实质：基因重组6、结果：获得人类所需要的基因产物第5页/共42页 DNA分子1．基因工程是指按照人们的意愿，在 水平，进行严格的设计，通过 和 等技术，赋予生物以 ，创造出更符合 。它也叫 。 DNA重组转基因新的遗传特性人们需要的新的生物类型和生物产品。DNA重组技术或基因拼接技术。第6页/共42页基因工程的概念基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 DNA分子水平剪切→ 拼接→ 导入→ 表达基因重组人类需要的基因产物第7页/共42页二、DNA 重组技术的基本工具“分子手术刀” ──限制酶 “分子缝合针” ──DNA连接酶 “分子运输车”（运载体 ） ──基因进入受体细胞的载体 三、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶第8页/共42页 1、来源： 2、种类：3、作用：粘性末端4、结果：平末端原核生物（微生物）一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并且能在特定的切点上切割DNA分子(酶的专一性)6、特点：4000种。识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开. （特异性）形成两种末端5、例子： EcoRΙ（大肠杆菌限制酶）、SmaΙ第9页/共42页黏性末端和平末端 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端。而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。第10页/共42页大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A或A与G之间切开。 SmaI识别CCCGGG序列,并在C和G或G与C之间切开。 限制酶第11页/共42页什么叫黏性末端？限制酶第12页/共42页什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。第13页/共42页什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。第14页/共42页第15页/共42页限制酶的识别序列：能被限制性内切酶特异性识别的切割部位都具有回文序列：在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。Go back第16页/共42页寻根问底P4你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是是什么吗？防止外来病原物的侵害。当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。第17页/共42页[课堂反聩]1.下图示限制酶切割DNA分子的过程：从图中可知，该限制酶能识别的酶基序列及切点是 （ ）A、CTTAAG，切点在C和T之间B、CTTAAG，切点在G和A之间C、GAATTC，切点在G和A之间D、GAATTC，切点在C和T之间C第18页/共42页E·coli DNA连接酶T4 DNA连接酶 1、种类：2、作用部位：两类磷酸二酯键 作用:将双链 DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 ,这样一个重组的DNA分子就形成了。四、 “分子缝合针” —— DNA连接酶第19页/共42页第20页/共42页第21页/共42页E·coli DNA连接酶　　　　　　　　或T4DNA连接酶 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键第22页/共42页T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低　T4DNA连接酶第23页/共42页（二）“分子缝合针”——DNA连接酶3、 E·coliDNA连接酶与T4DNA连接酶比较：功能类型来源相同点差别E·coliDNA连接酶大肠杆菌只能连接黏性末端恢复磷酸二酯键能连接黏性末端和平末端(效率较低)T4DNA连接酶T4噬菌体第24页/共42页寻根问底DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?DNA聚合酶DNA连接酶区别1区别2相同