《生化分离技术实验》教学大纲最终版.docxVIP

《生化别离技术实验》教学大纲 一、说明： 《生化别离技术》是生物技术专业的必修课，是一门研究生化物质的各种别离纯化技术 的专业课，是生物工程学科的重要组成局部，该课程是本专业学生必须掌握的一门课程。通 过实验使学生能掌握生化别离中重要别离技术的原理和方法。 （一）教学目的和要求： 1、在本实验课程中培养和提高学生运用生物别离技术的原理的能力。 2、掌握生物别离技术的基本方法和技能，培养学生正确记录实验数据和现象、正确处理实 验数据和分析实验结果的能力。 3、培养学生严谨认真、实事求是的科学态度和良好的实验作风。 4、在教学中，教师要向学生讲明该实验课的性质、任务，并使学生明确实验课的地位和作 用，提高学生学习的主动性。 5、学生实验前，必须预习实验内容，了解每个实验的目的、原理和方法。 6、实验过程中，要求学生操作要规范、做好实验原始记录、爱惜仪器、节约药品、遵守安 全制度、使学生养成良好的实验习惯，树立良好的学风。 7、要求学生实验后按时完成实验报告。 （二）教学重点和难点 本课程教学重点为沉淀方法原理和适用性；膜别离机理的两种模型，常用的浓差极化和 膜污染的特征解决方法；溶剂萃取法的分配定律的灵活运用；离子交换法机理；吸附法；色 层别离原理和适用范围；常用的色层别离技术理论；结晶技术理论等。 本课程教学难点为1.各种生化别离方法的原理；2.生化别离技术在生产及科研实践中 的应用。 （三）教学方法和改革措施 （1）通过本课程的课堂讲授与课外自学； （2）内容求精求新，以培养兴趣、增长知识、鼓励创新为目的，以说明基本原理和研究设 计思路为重点，结合实例简单介绍基本工艺，不断补充该学科最新进展。重点章节发放英文 研究论文资料，鼓励学生自学讨论。 （四）总学时12学时 （五）学分1学分 （六）开课学期三年级上学期 二、大纲内容和学时分配 （-）教学内容实验一盐析沉淀 一、实验学时：2二、实验目的：（1）掌握研析的原理与方法；（2）利用盐析法别离不同蛋白质（本实验中 别离球蛋白与清蛋白）。 三、实验内容：盐析法别离蛋清中的球蛋白和清蛋白；四、实验要求：（1）掌握盐析的原理与方法；（2）学习设计别离不同蛋白的实验步骤。 五、实验所需仪器设备仪器类：试管，烧杯，量筒，玻棒，离心机，天平，牛角匙，电炉，铁架台等。 化学试剂类：1.蛋白质溶液：5%卵清蛋白溶液或鸡蛋清水溶液（新鲜鸡蛋清：水=1： 9）；2.硫酸镂。 实验二去细胞壁的枯草芽抱杆菌液体培养一、实验学时：2学时 二、实验目的：（1） 了解无菌操作的要求；（2）学会细菌接种、培养方法；（3）学会用 氨苇青霉素或溶菌酶去革兰氏阳性菌细胞壁的方法。 三、实验内容：枯草芽胞杆菌液体培养，氨年青霉素或溶菌酶去细胞壁。 四、实验要求：（1） 了解无菌操作的要求（2）学会细菌接种方法（3）学会用氨苇青霉素 或溶菌酶去革兰氏阳性菌细胞壁的方法。 五、实验所需材料及仪器设备： 实验仪器及耗材：接种针，接种环，酒精灯或煤气灯，消毒酒精棉球，镜子，试管架，标签纸，培养箱（37℃）电子天平，pH if,微波炉，超净工作台 实验材料：（1）菌种:枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis） （2）培养基试剂：葡萄糖（或蔗糖），蛋白豚，氯化钠，牛肉膏，琼脂，氨茉青霉素，溶 菌酶。 实验三 选择变性剂沉淀法去除DNA中的蛋白质杂质一、实验学时：2学时 二、实验目的：1.了解酚氯仿法破碎细胞的原理。 . 了解酚氯仿法去除DNA中的杂蛋白的原理。 .学习DNA的纯化技术。 三、实验内容：酚氯仿破碎细胞，酚氯仿去除杂蛋白，DNA的纯化。 四、实验要求：掌握酚氯仿破碎细胞的原理和技术，掌握酚氯仿异戊醇去除杂蛋白的原理与 方法，掌握选择变性沉淀的原理，了解DNA纯化的基本技术。 五、实验所需材料及仪器设备： . 活材料：枯草芽胞杆菌（Bacillus, subtilis）.培养基：牛肉膏蛋白陈培养基（牛肉膏，蛋白陈，NaCL琼脂）。 .试剂：苯酚，氯仿，异戊醇，乙醇.实验用品：三角瓶，接种环，酒精灯，试管，接种针，离心机等。 实验四 凝胶色谱法别离甘油三酯 一、实验学时：4二、实验目的：通过从粗油中别离甘油三酯，学习运用凝胶色谱法别离油脂中各个成分的方 法。 三、实验内容：吸附色谱是利用吸附剂对被别离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱, 以使组分别离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。硅胶色谱频繁 使用在脂质中的单一脂质，糖脂质以及磷脂质的别离。各种脂质被硅胶吸附，随着洗脱溶液 的极性增加，各种极性不同的化合物被别离出来。 四、实验要求：（1） 了解从粗油中别离甘油三酯的方法；（2）学习凝胶色谱别离方法。 五，实验所需基本仪器设备： 1实验所需基本仪器设备：层析柱（1.5X 75cm） 25