实验二徒手切片法和临时装片的制作方法以及植物细胞和组织观察.pdfVIP

实验二临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察 一、 实验目的 1、 掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法 2、 了解植物细胞结构。 二、 实验材料 显微镜、载玻片、盖玻片、镶子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛 笔、滴 管、纱布、 0.9%的NaCl溶液；洋葱、马铃薯、芹菜、番茄 三、 实验内容和实验方法 (一) 临时装片的制作 1、 擦净载玻片和盖玻片 (1)擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘，右手用纱布将载玻 片 上下两面包住，然后反复擦拭，擦好后放在干净处备用。 (2)擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角，再将右手拇指 和 食指用纱布把盖玻片包住，然后从上下两面隔着纱布慢慢地进行擦试。 2、 取样 用滴管滴一点水或其他溶液(根据需要)于载玻片的中央，把观察物放于 载玻片 上的液滴中，展开或摇匀。 右手持镶子，轻轻夹住盖玻片的一角，使盖玻片的边缘与液滴的边缘接 触，然 后慢慢倾斜下落，最后平放于载玻片上，避免气泡的产生。如盖玻片下的液体过多， 可用吸水纸将多余的液体吸掉。 （二） 徒手切片法 徒手切片法不需要任何的机械设备，只需要一把锋利的刀片就可以完成切 片的 制作，方法简单，也容易保持物的生活状态，有很大的实用价值。 1、选材 选择软适度的材料，先截成适当的段块。一般直径大小以 3~5mm、长度以 20~30mm为宜。若材料太软，如幼叶等，不能直接拿在手中进行切片，可用适 当大 小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物，将材料夹入其中，一起切片。 2、切片 用左手拇指、食品指和中指夹住材料，使其稍突出在手指之上，拇指略低 于食 指，以免刀口损伤手指。材料和刀刃上蘸水，使其湿润。右手拇指和食指 横向平握 刀片，刀片要与材料断面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面 的位置，以均 匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。切片时要用臂 力而不用腕力，手 腕不要动，靠肘、肩关节的屈伸来切片，拉切要快，中途不 要停顿，更不能用拉锯 方式进行切片。 每切2~3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备 用。 如发现材料切面出现倾斜，应修平切面后再继续切片。 3、镜检观察 连续切下很多切片后，挑选最薄的切片放于加了 1滴清水的载玻片，盖上 盖玻 片，制成临时装片，进行镜检、观察。 （三） 植物细胞的结构观察 1、洋葱表皮细胞的观察 取一洁净载玻片，于载玻片中央加上一滴水。取洋葱一个，剥下一片新鲜 的带 紫色的南鳞叶，和刀片从外表面（或内表面）切一个面积为 4mm2左右的 方形小格，然后用镶子将表皮撕下，迅速入入载玻片上的小水滴中（表面向 上）。 并使其平展，盖上盖玻片，即制成临时装片。将装片放在显微镜下，用 低倍镜观察 细胞结构。 (1) 细胞的形状 洋葱表皮由一层细胞构成，所有的细胞都有相似的一扁砖状。细胞之间排列紧 密，没有间隙。 (2) 细胞壁 为植物细胞所特有的结构，较透明，因此只能看到其侧壁。 初看时，好像两个相邻细胞只有一层壁，但是，通过增加反差和仔细调焦 就能 发现这实际上是三层，即两侧相邻两细胞的细胞壁及中间的胞间层。 (3) 细胞质 为无色透明的胶状物，充满整个细胞。由于中央有大的液泡，被挤成一薄 层， 分布于细胞周围，仅细胞两端较明显。 (4) 细胞核 为球形小体。由于中央有大液泡，也被挤向近细胞壁处。 (5) 细胞膜 非常薄，而且与细胞壁紧贴在一起，因此不易观察到。 (6) 液泡 一个或几个，位于细胞中央，里面充满细胞液，所以比细胞质透明。 2、果肉离散细胞观察 用解剖针挑取少许已经红熟的的番茄果肉(以临近果皮的为好)，把它 放在载 玻片上的水滴中，用解剖针将果肉细胞拨匀，分散得越开越好，盖上盖 玻片，在显 微镜下观察。可以看到圆形或卵圆形的离散细胞，同样也可以观察 到细胞壁、细胞 核和很大的液泡。此外，还可以看到带色的圆形小颗粒，即有 色体。 3、厚角组织 用徒手切片法做芹菜叶柄的横切片，选取薄而透明的切片制成临时装片，