dna的粗提取与鉴定.pptVIP

Denature Anneal PCR Primers Extend PCR Primers w/Taq Repeat… 多聚酶链式反应（PCR） 扩增DNA片段 一、实验目的 了解PCR的基本原理，学习PCR的基本操作技术。 二、实验原理  多聚酶链式反应（Polymerase Chain Reaction， 简称PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法。典型的PCR由高温变性、低温退火和适温延伸三步反应组成一个循环周期，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其原理如下：将待扩增的DNA置于高温下使之解链，人工合成的两个寡核苷酸引物在低温下分别与目的片段两侧的两条链互补结合；DNA聚合酶在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，沿模板5’→3’端方向延伸，合成DNA的新互补链。反复进行这种变性、退火和延伸反应循环，可使两引物限定范围内的DNA序列以指数形式扩增。循环的次数主要取决于模板的浓度，从理论上讲一个模板DNA分子经20次循环扩增后可达106。 PCR的基本原理 变性、复性、半保留复制 一生二，二生四，四生万物 PCR三步曲 变性 90～97℃ 退火 45～65℃ 延伸 72℃左右 PCR过程 (二) PCR的反应过程 变性-复性-延伸 多重循环(n) 模板以2En扩增 短片段以指数