细菌内毒素检测 7、案例分析.pdfVIP

案例分析 湛江安度斯生物有限公司 2016年7月 实验助手APP授权发布 1 案例分析 活性炭（供注射用）细菌内毒素 检查 鲎试剂灵敏度复核不符合规定原 因调查 一种疫苗的半成品BET结果分析 生产过程控制原辅料的内毒素限 值计算 2 （一）活性炭（供注射用） 细菌内毒素检查 3 活性炭（供注射用）细菌内毒素检查 • 包括： 活性炭所含内毒素本底值 活性炭对细菌内毒素吸附力 4 活性炭所含内毒素本底值 • 1.检测标准：称取约75mg活性炭，加入约5ml细菌 内毒素检查用水配置成活性炭浓度为1.5% （1.5g/100ml)的混合溶液，旋涡混合9分钟，然后 1500转离心5分钟，离心后，取上清液用0.22μm 无热原滤膜过滤 ，取续滤液按照通则1143检测，样 品细菌内毒素应小于2EU/g。 • 从以上检测标准和方法，我们可以确定： 供试品溶液的配制方法； 配制供试品溶液的浓度：0.015g/ml 细菌内毒素限值（L）：＜2EU/g； 鲎试剂的灵敏度范围：λ=C×L=0.015×2=0.03 （EU/ml）或以上； 5 2.供试品溶液的制备 关键：实验 用具的选择 称取约75mg活性炭 称样 和验证！ 加入约5ml水 加水 旋涡混合9分钟 提取内毒素 1500转离心5分钟 分离活性炭 0.22μm滤膜过滤 再分离活性炭 注：“约”：不得超过±10% 6 3.例子 Ⅰ-凝胶法干扰试验 （1 ）供试品 细菌内毒素限值：2EU/g ； （2 ）试剂、仪器 名称 厂家 规格 标示效价 数量 鲎试剂 安度斯 0.1ml/支 0.03EU/ml 28支 细菌内毒素国家标准品 中检院 \ 10000EU/支 1支 细菌内毒素检查用水 安度斯 30ml/瓶 \ 1瓶 TAL-40D恒温仪 安度斯 40孔 \ 1台 7 3.例子 Ⅰ-凝胶法干扰试验 • （3 ）最低有效浓度的计算 C=λ/L=0.03EU/ml/2EU/g=0.